表达H3N2亚型猪流感病毒HA重组伪狂犬病病毒免疫效力评价.pdf

摘要 猪流感(sI)是一种非常普遍的猪的急性、热性和高度接触性呼吸道系统疾病，其病原主 要是H3N2或川Nl弧型猪流感病毒(slv)。由于猪可感染禽流感病毒和人流感病毒，被认为 是流感病毒的混合器和新亚型流感病毒的)Jnm场，因此，研制安全、有效的SIV疫苗来预防 猪流感不但可以减少养猪业的经济损失，而且对食晶安全和公共卫生具有重要意义。 本研究将含有H3N2Ⅱ型猪流感病毒A]Swine／lnner 共转染Veto细胞，通过数代蓝斑克隆筛选、纯化后，获得了一株重组伪狂犬病病毒，命名为 接免瘦荧光试验显示，HA蛋白表达于被感染细胞的胞浆中。 为了评价此重组病毒作为侯选疫苗的免疫效力，本研究先后以鼠和猪为动物模型对其进 行了评价。以小鼠为动物模型对重组伪狂犬病病毒rPRV-HA进行的免疫效力评价试验中，按 o)。于免 疫后不同时间分别从rPRV-HA免疫组和Bartha．K61免疫对照组随机剖杀一定数量的小鼠， (SwHLJ74)进行攻击。攻毒后第4、7和14d，分别剖杀小鼠，进行间接免疫荧光、病毒分离、 血清学和病理组织学检测。结果表明．重组病毒主要分布于肺脏；免疫后14d起，从rPRV-HA 检测到针对SIV的荧光抗体和血凝抑制抗体．而各对照组均呈阴性。攻毒后从rPRV-HA免疫 封1小鼠未分离到攻击病毒，血凝抑制抗体显著升高，病理变化比对照组明显轻微，表明 rPRV-HA免疫小鼠可以抵抗同弧型SIV的攻击，可以作为rPRV-HA免疫效力评价模型。 以商品猪为动物模型，对重组伪狂犬病病毒rPRV-HA进行的免疫效力评价试验中，按每 只105 oTCID50 A／swine／Heilon 症状，但对照组有明显的体温升高，显示出了免疫组受到一定的保护作J=Ij。小猪鼻拭子分毒 结果显示免疫组和对照组在攻毒后6d都能分离到病毒。从支气管和肺泡冲洗液的检测结果可 以看出，攻毒后4d各组均可检测到病毒，7d时rPRV-HA免疫组却没有再次检测到病毒，对 的中和抗体；rPRv．HA免疫组可以检测到针对SIV的血凝抑制抗体，而各对照组均呈阴性， 并且所有对照组小猪也在攻毒之后7d开始产生了血凝抑Sq](H1)抗体。尸体剖检结果方面，组 织冰冻切片的间接免疫荧光朱检测到任何病毒粒子，免疫组与对照组均只有个别小猪肺脏山 现轻微病理变化，其统计学意义不大，但是显微病理变化方面rPRuHA免疫组却表现出非常 明显的病理保护作j；}4。综合本试验结果，rPRv-HA的免疫接种对同亚型SIV攻击具有较好的 保护作_L}j。 关键词：重组伪狂犬病病毒：H3N2瓶型：猪流感病毒：动物模型；免疫效力 Immune EvaluationofaRecombinant Efficacy HA Swine PseudorabiesVirus ofH3N2 Expressing inMiceand InfluenzaVirus Pigs Abstract Influenzaisacommon diseasein itisa andinfectious raspimtory pigs，andacute，feverish disease．Swineinfluenza H3N2and SIVisthe virus(SIVlespecially HINlsubtypeprevalent ofSI．Swineisthe animalwhichcanbeinfectedeitheravianorhuman pathogens only by original influenza