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动物实验 一、实验动物的编号与标记 编号与标记通常是动物实验开始时进行的第一项工作。编号的目的是使个体易于识别，便于实验者观察每个动物的变化，为清楚记录结果做好准备。无论何种编号方法，良好的标记方法都应满足号码清晰、耐久、简便和适用的要求。 （一）染色法 常用的染液有3%～5%的苦味酸溶液（黄色）、2%的硝酸银溶液（咖啡色）、0.5%的中性品红溶液（红色）。染色法编号的原则是“先左后右，先上后下”。 （二）穿耳孔法 （三）剪趾法 （四）挂牌法 （五）挂腿圈法 （六）烙印法 （七）针刺法 （八）剪尾法 剪尾法是将动物尾尖部剪去，一般用于大鼠、小鼠的分组，但仅限于将两组动物区分开，无法给每只动物编号。如果若需进行尾尖取血，此法不适用。 （九）剪毛法 剪毛法是将动物背部的被毛用剪刀剪去，用于标记，此法编号标记清楚、可靠，便于试验人员观察，常用于大中型动物的编号。 二、实验动物的分组 （一）随机分组的原则及方法 动物编号后，通常需要根据实验要求进行分组。动物随机分组一般使用随机数字表或用计算器产生随机数字来进行。 （二）分组的注意事项 动物随机分组的目的在于使某实验中的某主要指标平均分配到各个组中，为确保实验结果具有统计学意义，实验分组时应注意各组动物的数量不可太少，一般需进行统计学处理的实验数据，各组动物至少不可少于6只，若再考虑到实验过程中出现意外等情况，动物数量还需适当增加。 实验分组时还应考虑到动物性别的影响。如果条件允许，可选择雌雄各半进行实验，但应保证雌雄动物的实验数据均应具有统计学意义；若条件不允许，考虑到雌性动物的生理因素，选择雄性动物进行实验为好。 三、实验动物的抓取和固定 小鼠的捉取与固定 小白鼠正常体温37℃左右，小鼠性情比较温顺，一般不会主动咬人。在小鼠较安静时打开鼠笼盖，一般情况下用右手在靠近鼠尾尾根部捏住并将其提起，放在较粗糙的平面或鼠笼盖上，轻轻地向后拉鼠尾，当其向前爬行时，用右手拇指和食指捏住小鼠颈部皮肤和两耳，捏住的皮肤要适量，太多太紧小鼠会窒息，太少太松小鼠会回头咬伤实验者。捏住后翻转右手，掌心向上，将鼠体置于右手掌心中，左手拉住小鼠尾部，用左手无名指或小指压紧尾根，使小鼠身体成一条直线（图2）。此种抓取固定方法适用于肌肉注射、腹腔注射、灌胃等操作。 图1 小鼠的抓取 图2 小鼠固定 豚鼠的抓取与固定 豚鼠正常体温38.6(37.8～39.5)℃，豚鼠性情温顺，一般不咬人。抓取时，不能粗暴，更不能抓腰腹部，这样易造成肝破裂而引起死亡。抓取幼小的豚鼠时，可用双手捧起。抓取较大的豚鼠时，可将手轻轻地伸进笼子，先用手掌扣住豚鼠的背部，抓住其肩胛上方，将左手张开，用手指抓住颈部慢慢将其提起。怀孕或体重较大的豚鼠，应用右手托起臀部（图4）。 图3大鼠的抓取 图4豚鼠的抓取及固定 四、注射免疫方法 (一)皮下注射 皮下注射一般选取皮下组织疏松的部位，大鼠、小鼠和豚鼠可在颈后肩胛问、腹部两侧作皮下注射，猪的皮下注射部位为耳根部皮下。牛的皮下注射部位是颈部的两侧或者肩胛后方的胸侧皮肤容易移动的部位。皮下注射时，先用酒精棉球消毒需注射部位的皮肤，再将皮肤提起，进针时，从头部方向刺入皮下，再沿体轴方向将注射针推进5～10mm，若针尖易左右摆动，表明已刺入皮下。然后轻轻抽吸，如无回流物可缓慢注射药液。注射完毕，缓慢拔出注射针，用干棉球压针刺部位，以防止药液外漏。 (二)肌肉注射 肌肉注射一般选肌肉发达，无大血管通过的部位。大鼠、小鼠、豚鼠可注射大腿外侧肌肉。猪的肌肉注射部位为颈部肌肉或者耳后肌肉。牛的肌肉注射部位是颈部三角区（项韧带下缘，胸头肌后缘，肩胛骨前方围成的）、后臀的前外侧（髋结节后面的）。 (三)腹腔注射 给大鼠、小鼠进行腹腔注射时，以左手固定动物，使腹部向上，为避免伤及内脏，应尽量使动物头处于低位，使内脏移向上腹，右手持注射器从下腹两侧向头方刺入皮下，针头稍向前，再将注射器沿45℃角斜向穿过腹肌进入腹腔，此时有落空感，回抽无回血或尿液，即可注入药液。 （四）皮内注射 皮内注射用于观察皮肤血管通透性变化或皮肤反应。大鼠、小鼠、豚鼠、家兔等动物皮内注射常选择背部脊柱两侧的皮肤。猪的皮内注射一般选取耳壳外面或腹侧皮肤注射。操作时需先将动物注射部位脱毛，酒精棉球消毒局部，用左手将皮肤捏成皱襞，右手持注射针，将针头与皮肤大约呈30℃角刺入皮下，然后使针头向上挑起并稍刺入，即可注射。注射后，皮肤表面可见鼓起一小丘，停留片刻拔出针头。 五、采血方法 （一）大鼠、小鼠的采血方法： 1、