降血脂溶栓保健啤酒初步.pdfVIP

摘 要 本实验先对含连有纤溶酶基因的分泌型表达载体pPIC9K 的大肠杆菌DH5α活化 后，提取质粒，并将其转入酿酒酵母菌中，得到一株含有纤溶酶基因的酿酒酵母菌， 并对外源基因的表达和稳定性做了分析。同时对重组酿酒酵母菌的发酵特性做了分 析，主要比较了重组酿酒酵母菌与原始酿酒酵母菌在接种量、温度、pH 上的选择和 酿酒酵母菌的酒精耐受性、热死灭温度、凝聚性、发酵力的变化，分析转入了纤溶 酶基因对酿酒酵母菌的发酵能力是否产生影响。最后用重组酿酒酵母菌做啤酒发酵 试验，检测主发酵结束后发酵液中的纤溶酶含量，为生产具有降血脂溶栓功能的保 健啤酒提供理论支持和依据。 研究结果表明，通过PCR 检测证实纤溶酶基因已在酿酒酵母菌基因组内整合， 通过纤溶酶活性检测进一步证实纤溶酶基因可在酿酒酵母菌体内分泌和表达。在没 有选择压力的情况下，纤溶酶基因的遗传稳定性很好，5 代内都能稳定传代。 通过比较重组酿酒酵母菌与原始酿酒酵母菌在接种量、温度、pH 上的选择，得 到的结果：在接种量和 pH 值的选择上没有很大的差异，在接种量为 1％，pH 值为 4.5 时，能达到最好的效果；在发酵温度的选择上存在差异，分别在30℃和28℃能 达到最好的效果。由此看出，转入了纤溶酶基因对酿酒酵母菌在接种量、温度、pH 上的选择差异不大。 通过比较重组酿酒酵母菌与原始酿酒酵母菌的酒精耐受性、热死灭温度、凝聚 性、发酵力，得到的结果：酒精耐受性实验中耐酒精能力均为 12％；热死灭温度实 验中两株菌的热死灭温度均为60℃；凝聚性试验中，本斯值分别为 1.4 和1.3，凝 聚性适中；发酵力实验中两株菌的发酵速率、真正发酵度、外观发酵度基本相同。 由此看出，两株菌的发酵性能基本一致，转入了纤溶酶基因对酿酒酵母菌的发酵性 能影响不大。 啤酒主发酵完成后，发酵液经处理后在波长为595nm 处测吸光值，带入标准蛋 白曲线中得到啤酒发酵液中纤溶酶的含量为125.14U/ml。 关键词：保健啤酒；酿酒酵母菌；纤溶酶基因；发酵特性；表达 Primary Study on Hypolipidemic thrombolysis Care beer Abstract In this study, the first containing even secreted plasminogen gene expression the vector pPIC9K activation of E. coli DH5α ，then plasmid and transferred to S. cerevisiae, get one containing the plasminogen gene of Saccharomyces cerevisiaebacteria, and exogenous gene expression and stability analysis. At the same time we analysis the fermentation characteristics of recombinant Saccharomyces cerevisiae ，and the main compared the choice of recombinant Saccharomyces cerevisiae with the original Saccharomyces cerevisiae in the inoculum size, temperature, pH and ethanol tolerance ， heatto Simie temperature, cohesion, fermentation changes of Saccharomyces cerevisiae, analysis the transferred to the fermentation capacity of the plasminogen gene of Sa