Bufalin对裸鼠食管鳞状细胞癌原位移植瘤mTOR%2f4E-BP1信号通路及其凋亡的影响.pdf

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………5 通路及凋亡的影响 前言……………………………………………………………………10一日U吾……………………………………………………………………l 材料与方法……………………………………………………………10 结果……………………………………………………………………22 附图……………………………………………………………………25 附表……………………………………………………………………34 讨论……………………………………………………………………37 结论……………………………………………………………………40 参考文献………………………………………………………………40 综述 mTOR信号通路的研究进展…………………………………44 致谢………………………………………………………………………53 个人简历…………………………………………………………………54 中文摘要 通路及凋亡的影响 摘 要 食管癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，目前排在我国恶性肿瘤的第四 位，在我国恶性肿瘤中占22．4％，每年约有25万新病人产生。食管癌的临 床治疗虽有进步，5年生存率仍然较低。因此，研究与食管癌发生发展相 关的信号转导通路及药物作用的靶点来寻求新的抗肿瘤药物，成为食管癌 治疗研究的重点。 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammaliantarget 4E．BP 3． 1是磷脂酰肌醇3一激酶／蛋白激酶B(phosphatidy’linositol B，P13K／PKB)信号通路的下游分子，在调节细胞生 Kinase／proteinkinase 释放并与其他翻译起始因子形成复合物，从而解除对翻译的抑制作用，导 致翻译起始，加速与生长分化相关的蛋白的表达。当mTOR被抑制时， 始。研究表明，4E．BPl的磷酸化在肿瘤的发生发展中起重要作用，因此 该通路是目前研究的焦点，为临床治疗肿瘤提供新的靶点。 Bufalin(蟾蜍灵)是中药蟾酥中提取的一种毒性配基，属强心甙类物 质。这种成分具有抗癌、强心、抗炎、增强免疫等作用，临床上已广泛应 用于治疗多种实体肿瘤、血液病和慢性乙肝等疾病。我们前期的体外实验 表明：Bufalin可有效抑制食管癌细胞的生长和增殖。本实验旨在进一步 探讨Bufalin在食管癌动物模型中的抗肿瘤作用，为临床应用于食管癌的 治疗提供实验依据。 目的：探讨Bufalin对裸鼠食管癌原位移植瘤的抑制作用及其可能诱 导凋亡的机制。 方法： l将36只人食管癌细胞株ECAl09建立的裸鼠原位移植瘤模型随机 中文摘要 剂量组与雷帕霉素联合组(BR)，每组6只，腹腔注射给药持续30天，用 药结束后全部处死36只裸鼠，完整取出肿瘤，测量裸鼠用药前后的体重、 肿瘤大小，计算肿瘤抑制率。 2肿瘤组织HE染色观察肿瘤坏死程度。 3RT．PCR法检测各组mTOR、4E．BPlmRNA的表达情况。 4Western 的蛋白水平表达及4E．BPl的活化情况。 5流式细胞技术检测各组移植瘤细胞的凋亡指数。 结果： 差异无统计学意义(PO．05)。治疗后各组移植瘤体积分别为 1．79 1+0．087cm3、1．720+0．088cm3、1．1 缩小(PO．05)，BR组肿瘤体积与其余各组比较缩小，差异均具有统计 学意义(PO．05)。 2肿瘤组织HE染色显示：各组移植瘤内均可见坏死。模型组坏死少 见；BL组以灶状坏死为主；BM组肿瘤组织内可见大片状坏死；BH、RAPA 及BR组均可见大面积坏死，坏死组织内可见散在癌细胞团。 3 瘤4E．BPl O．05)。各组移植瘤mTOR 水平与其余各组比较降低，差异均具有统计学意义(尸O．05)。 4West