银杏雌、雄基因组间的比较的分析.pdfVIP

银杏雌．雄基西组阃的比较研究 街 要 摘 要 l 卜陛别是从低等的生物到高等的动植物都普遍存在的生物性状。在动物中， ＼ 特肃是哺乳动物性别决定的遗传基础得到了深入的研究，以SRY基因为代表的 性别决定或相关基因相继被克隆。在植物界，虽然产生单性花的雌雄单性同株 的玉米(Zea 植物性别研究的模式生物，其性别决定机制得到了较为广泛和深入的研究，但 至今人们对植物性别决定的遗传基础了解的还很肤浅：而对裸子植物，由于它 们通常要经历十几年甚至几十年才能开花得到性别确定的个体，因而关于其性 l／—、～ 别决定的遗传基础则更是知之甚少，许多方面尚属空白。j／ L， biloba 本文以裸子植物一银杏(GinkgoL)为材料，首次利用分子生物学 技术，分析了银含雌雄两性基因组间DNA的多态性和差异性，筛选r与其性别 相关的分子标记．分离了雌、雄基因组问的差异片段；同时本研究埘葫芦苏铁 (Cycas r 并初探讨了WD重复蛋白基因序列在银杏和苏铁中的保守性。巨要结果如下： l 组合，检测了银杏雌、雄基因组DNA问的多态性。在检测的4158个位点中， 只有一个位点表现出性别差异，该差异标记为雄性基因组所特有。试验数据绎 统汁分析得m银禽雌、雄基因组DNA问的RAPD标记相似率为9998％。雄性 Center 讲j’纹。该差异儿段经测序并输入NCBl(National Biotechnology Information)核酸数掘库应j=}j 提交斤被GenBank GSSs(GenomeSurvey ¨为：AZ527393和AZ527394。 堑查竺：生堡!堕塑丝丝i!：!堕——————型生—兰 应用AFLP技术，分析了银杏雌、雄基因组DNA问的差异性，筛选了与 银杏性别相关的AFLP标记。应用48个引物组合，对银杏雌、雄基因组DNA 进行扩增，在每一性别基因组DNA的扩增中平均各得到1896条带纹，雌、雄 且YFl3-340片段经测序分析，其内包含有散在重复分布序列，重复单元为： TGGCCT：侣YF28．340则为雌、雄基因组的共有序列。 difference 将RDA(Representational capture subtraction)技术相结合，并加以改进，引入到银杏的性别研究中，用于分离银 杏雌、雄基因组DNA间的差异片段。并得到一个基因组DNA经BglII酶切后 现与其叶绿体DNA有87％的同源性。这一研究不仅探讨了银杏雌、雄基因组 间的性别差异，同时该结果为叶绿体起源进化中的基因转移假说提供了新的佐 证。 上述利用RAPD及AFLP技术对银杏雌、雄基因组间DNA的分析，其结 果经数据统计得出了银杏雌、雄基因组DNA间RAPD及AFLP标记具有极高 的相似性，作者认为：该结果从分子水平反映了银杏性染色体处于较低的分化 鉴定提供了候选的探针，也为进一步克隆其性别决定基因、相关基因或DNA序 列奠定了基础。 首次应用-RAPD技术，检测了葫芦苏铁雌、雄基因组问DNA的多态性， $30和$442)提供的5个多态性位点可在雌、雄DNA池和个体中稳定出现， 在雌、雄基因组间的杂交信号表现为限制性片段长度多态性。这两个标记经测 堡查丝：!堂奎!丝塑丝!!笪：!丝———————●堕—兰 伞GenBank 信号。 重复蛋白基因在银杏及葫芦苏铁中的保守性，研究结果初步说明在银