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泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定
一、实验原理
亚硝酸盐可以与对氨基苯磺酸发生重氮化反应,这一产物再与N-1-萘基乙二胺偶联,形成紫红色产物,可用光电比色法定量。
二、实验目的
1、进行泡菜的腌制;
2、进行亚硝酸盐的测定
三、实验用具及材料
泡菜罐、蔬菜、三角瓶、量筒、烧杯、试管及试管架、pH试纸、容量瓶、研磨过滤器或研钵、微量可调移液器、分光光度计、亚硝酸盐含量的测定试剂盒溶液:固体mL。混匀后mL,备用。
N-1-萘基乙二胺溶液: N-1-萘基乙二胺固体%乙酸充分溶解,然后将以上溶解液加入到79mL60%乙酸中再溶解,混匀后,在冰箱中4避光保存mL蒸馏水和24mL冰乙酸中,棕色瓶室温保存,使用时取上清液。
显色液:将N-1-萘基乙二胺溶液(上清液)等体积混合。
亚硝酸钠液:亚硝酸钠固体亚硝酸钠(测定时用):取1mL亚硝酸钠液100mL容量瓶中,即制得μg/mL亚硝酸钠标准液四、实验步骤
1、泡菜腌制
(2)按照清水与盐的质量比4:1的比例配制盐水,将盐水煮沸冷却。
(3)将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀,装入泡菜坛内,加入盐水没过全部菜料,盖好坛盖。
(4)将坛口用水封好,防止外界空气进入。
(5)泡菜发酵。
2、亚硝酸盐的定量测定
(1)样品:mL烧杯中,接着用20mL水洗涤研磨过滤器,合并滤液,用氢氧化钠溶液将pH调至8.0,再加入5mL硫酸锌溶液,混匀,如不产生白色沉淀,再加入氢氧化钠溶液至产生白色沉淀为止。在水浴中加热至60℃,10min后,冷却至室温,用滤纸过滤,用少量水淋洗沉淀2-3次,将滤液和洗涤液在100mL容量瓶中定容。
(2)测定:取2mL样品溶液,置于μL NH4Cl缓冲液,μL60%乙酸和1mL显色液,加水定容至5mL,混合混匀25min;mL水为空白对照
(3)标准曲线:吸取0,100,200,00,00μL的亚硝酸钠标准,分别置于加入μL NH4Cl缓冲液,μL60%乙酸和1mL显色液,加水定容至5mL,混合混匀25min;/(m1×V2 ×1000)
式中:X1为样品中亚硝酸钠含量,单位mg /Kg;m1为样品质量,单位g; m2为通过标准曲线得到的亚硝酸钠的质量,单位μg;V1为样品处理液总体积;V2为测定用样品液体积。若按照以上实验步骤,则m1 =5、V1=100、V2=2。
五、实验结果与分析
1、标准显色液
不同浓度亚硝酸钠溶液与显色液反应后的颜色梯度见下图:
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