糖尿病患者血浆nesfatin-1水平、人胃NUCB2测定及其MSG损毁弓状核对小鼠胃粘膜ghrelin、nesfatin-1的影响.pdf

11 IIIIIIlllll l IIIllI lIlll11111 Y1734387 能量摄入和消耗的不平衡成为肥胖发展和逆转的基础，但是对这些过程的控制及 白色脂肪组织的脂质沉淀和动员的转换结果的中枢机制还不清楚。对能量摄入和消耗 研究的优势主要集中在下丘脑前脑部位及环路，有更多的理由使研究局限的在下丘脑 弓状核(arcuate 的鉴定，且在下丘脑弓状核存在大量的瘦素受体。在弓状核内有两类细胞是瘦素的作 Y，NPY)和刺鼠色蛋白相关蛋白 用靶点，一类细胞产生神经肽Y(neuropeptide (agouti-relatedprotein，AgRP)，这两种肽是促进食欲的肽；另一类是产生阿黑皮素 related 反应，如能量平衡，就是损毁它。一种替换传统弓状核损毁的方法是出生后用谷氨酸 单钠处理(monosodium glutamate，MSG)来破坏弓状核。主要是因为弓状核血脑屏 障不完善，MSG能够渗透到大脑。 目的： 鉴定人类胃粘膜是否含有NUCB2／nesfatin。 检测小鼠弓状核和其它血脑屏障不完善的区域(如最后区)是否被MSG损毁，食 物剥夺后动员身体脂肪的贮存的能力是否受到干扰；弓状核损毁后是否影响到胃及血 浆的ghrelin、nesfatin．1水平。 方法： 20例正常人、10例I．型糖尿病和47例II．型糖尿病患者，空腹采血3ml；16例 健康志愿者，禁食12h后，男女各半分为两组，先空腹采血3ml，一组口服300ml生 ELISA法检测血浆nesfatin．1和血糖水平的变化。十例胃癌手术后切除的正常胃组织， 通过RT．PCR、Westernblot、免疫荧光双标实验鉴定人类胃粘膜是否含有 NUCB2／nesfatin。 新生健康昆明小白鼠，雌雄不限。随机分为正常对照组和MSG处理组，每组16 只。MSG处理组小鼠出生后隔日(第l，3，5，7和9天，共5次)于颈部皮下注射 MSG(4mg／g体重)，而正常对照组只给予同体积的生理盐水。第四周断乳后，放入摄 食分析仪测摄食；第十二周后，每组在正常饮食、禁食48h、再进食后，分别内眦取血， 测血浆ghrelin水平；此后每组再分为正常饮食组、禁食48h组，分别断头取脑，冰冻 切片观察弓状核损毁情况，取胃组织行RT-PCR、Western blot实验，以检测ghrelin、 nesfatin．1 mRNA及蛋白质水平；取各部位脂肪称重。 ． 结果： 平稍升高，但差别无统计学意义；Ⅱ．型糖尿病患者组血浆nesfatin．1水平明显低于I 型糖尿患者组和正常对照组。la 平(从基础水平0．99-x-0．23 ng／m1)，但观察到各个时间点血浆 ng／ml升高1．08：1：0．24 nesfatin．1水平无明显差别。 nesfatin—l共表达率为88．6％。 与生理盐水组小鼠相比，MSG组小鼠弓状核甲酚紫染色神经元明显减少(尸0．01)， 少(PO．01)。 从第四周断乳后，MSG组小鼠与生理盐水组小鼠比较，每周的摄食量没有明显改 变。第十二周后，MSG处理的小鼠比生理盐水处理的小鼠体重明显增加(Po．01)； MSG组小鼠和生理盐水组小鼠食物剥夺后，与各自自由饮食的小鼠相比体重也明显降 低(尸0．05)。与生理盐水处理的小鼠相比，MSG处理的小鼠在所分析的部位(腹膜 后、双侧腹股沟、性腺)白色脂肪组织量及肩胛间棕色脂肪组织都明显增加(po．01)， 白色脂肪组织的总量也明显增加(Po．01)。与生理盐水处理的小鼠相比，新生小鼠 MSG处理后不能阻断或减少食物剥夺后引起的白色脂肪组织脂质动员的减少。因此， MSG组小鼠和生理盐水组小鼠食物剥夺后，与各自自由饮食的小鼠相比，腹膜后和双 侧腹股沟的白色脂肪量明显降低(Po．0