转Bt基因植物花粉对意大利蜜蜂影响的研究.pdfVIP

中文摘要 中文摘要 目前国际上纷纷开展了转抗虫基因植物花粉对非靶标昆虫特别是对有益昆虫如蜜蜂、瓢 虫、草蛉等影响的研究，但多针对昆虫发育和行为研究，针对影响机理研究尚不多见。本试 验通过饲喂意大利蜜蜂幼虫转Bt—CrylAb玉米、Bt—CrylAc棉花花粉，观察幼虫的生长发育情 Border 况，测定体内一些解毒酶、蛋白酶活性变化，并分离了意蜂、棉铃虫中肠BBMV(Brush MembranceVesicles)．进行结合动力学研究，主要结果如下： 取食Bt花粉的蜜蜂与取食非Bt花粉的意蜂相比，幼虫和蛹的发育历期差异没有达到显 著水平，其4日龄、5日龄平¨6日龄幼虫的体重也没有明显差别。体内酶活性方面．取食Bt 玉米、棉花花粉蜜蜂6日龄幼虫体内谷胱甘肽一s一转移酶活性、总蛋白酶活性处理组和对照组 差异不显著。而Ct．．乙酸萘酯酶、乙酰胆碱酯酶、强、弱碱性类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶活 性，处理组干¨对照组均有明显差异。通过Elisa方法检测，发现取食Bt玉米花粉的蜜蜂6日 龄幼虫体内能够检测CrylAb杀虫蛋白，取食Bt棉花花粉的蜜蜂6日龄幼虫体内能够检测 CrylAc杀虫蛋白。 利用差述离心法，分离了意蜂、敏感品系棉铃虫BBMV。通过SDS．PAGE电泳发现：在 连续的蛋白条带，在210kDa处有一条比较明显的条带。 外标记结合试验。结果显示：蜜蜂与CrylAc的亲干¨性常数Kd值高于棉铃虫(约为5倍)， 说明意蜂与CrylAc亲和力低于棉铃虫，且其结合位点浓度Rt值低于棉铃虫(2倍)i意蜂 力远低于棉铃虫，但是二者的结合位点浓度Rt值相差不大。 以上研究表明，取食转Bt基因植物花粉的意蜂幼虫，能够引起其体内某些酶活性的变 化，但并未对其生氏发育产生不利影响。同时结合动力学实验表明，Bt毒素与意蜂幼虫中肠 BBMV的结合能力很弱，因此可以说转Bt基因植物对意大利蜜蜂无不利影响。 关键词：意大利蜜蜂；棉铃虫：解毒酶：蛋白酶：BBMV：结合试验 on of Studiestheeffects of pollentransgenic plant(Bt)onApisMellifeta ABSTRACT The ofthe influencethe study impactoftransgenicplant non-target been more itmostto thebehaviorand for international，but poplour study development，less mechanismInthis A larvaewerefedwith article，The uom mellifera Bt·crylAb transgenic cotton inthe the pollen，transgenic Bt—cwlAcpollen laboratory,measuredevelopmentoflarve，The ofthreemetabolic and Thebrushbordermembrane activitychanges enzymesmidgut