共振瑞利散法和荧光法分析测定天然植物性激素及其分析应用研究.pdf

摘要 共振瑞利散射法和荧光法分析测定 天然植物性激素及其分析应用研究 分析化学硕士研究生 黎小艳 指导教师 杨季冬教授 摘要 天然植物性激素在现代农业、水果生产及园艺作物的组织培养的应用及潜在 的抗癌药物开发中都具有重大意义。虽然已有的分析方法：UV法、电化学法、 HPLC法、室温磷光法及质谱法等对研究6．苄氨基腺嘌呤，激动素等外源性细胞 分裂素类物质与一些物质的相互作用提供了重要的信息，但是这些仪器昂贵，运 行成本较高，而大多方法需要加热降解，操作繁琐。因此在使用这些大型仪器的 同时，发展像RRS等仪器价廉、简便快速的方法来获取外源性细胞分裂素类物质 与一些物质相互作用更加全面、更加丰富的信息是一项很有意义的工作。 本论文在国家自然科学基金项目(No和重庆市教委科技项目 (No．KJlOl308)的资助下，对天然性植物激素的分析测定进行了如下几个方面的研 究： · 1．6．苄氨基腺嘌呤一铜(Ⅱ)-三苯甲烷类染料体系的吸收和共振瑞利散射光谱及 其分析应用 在pH 应生成螯合物，再与三苯甲烷类染料形成三元离子缔合物，其摩尔比分别为2：1(里 斯沙明绿)，3：1(固绿)，2．5：1(水溶性苯胺蓝)。反应体系的吸收光谱发生变化，其 共振瑞利散射光谱(RRS)和倍频散射(FDS)显著增强，三个体系的最大RRS峰 均位于372眦附近，6．BA浓度在一定范围内的增加与相应的I汛S强度(㈣， FDS(△而曲强度和吸光度(△彳)均成线性关系。其RRS检出限分别为5．48ng·mLq(里 斯沙明绿)，18．43 ng·mL’1(固绿)，9．34ng·InL‘1冰溶性苯胺蓝)。据此建立6．Bo气一 西南大学硕十学1市论文 快速测定，结果令人满意。此外，本文还应用了计算化学软件Gaussview3．07和 的电荷分布，并对里斯沙明绿体系的反应机理及RRS增强的主要原因进行了初步 探讨。 ． 2．Na2Ⅵr04-6．苄氨基腺嘌呤螯合离子与罗丹明6G的相互作用对共振瑞利散射 光谱和荧光光谱的影响及其分析应用研究 配位形成1：l的螯合阴离子【6．BA·W04】2。，它能进一步与罗丹明6G阳离子反应形 成三元离子缔合物，引起共振瑞利散射(RRS)急剧增强并产生新的RRS光谱，同 时溶液荧光急剧猝灭。体系荧光的最大激发(¨和发射波长(k)分别位于290 11IIl和559 nm，最大RRS峰位于316m附近。在一定范围内，散射增强(刖hs) 与荧光猝灭程度(△斥)均与6．BA的浓度呈线性关系。据此可建立RRS法和荧光猝 灭法测定痕量6．BA，在优化的条件下，两种方法测定6．BA的线性范围和检出限 分别为：0．05～15．00 pg·mL。1和8．2ng·mL。1(RRS)，O．50一15．00pg·mLq和17．0 ng·mLq(荧光猝灭法)，而RRS方法明显优于荧光猝灭法。本文重点考察了RRS 及荧光猝灭法适宜的反应条件和影响因素；用RRS法考察了共存物质的影响，表 明方法具有良好的选择性；并用于黄瓜与青椒中痕量6．BA的测定，结果令人满 意；本文采用密度泛函法，在B3LYP／6．3lG基组水平上计算了6．BA的电荷分布， 并对三元离子缔合体系的反应机理进行了初步探讨；利用偏振同步光散射信号， 讨论了离子缔合反应的同步光散射偏振度，从而分析了其共振散射光的构成并分 析了RRS增强的主要原因。 3．激动素诱导芳香族氨基酸的荧光光谱变化研究 本研究建立了一种灵敏度高、简便、快速测定痕量激动素的方法。采用荧光 oC～30 2．02～3．79 猝灭法研究了室温下(12 oC)，pH BR缓冲介质中激动素与芳香族 氨基酸一色氨酸、酪氨酸及苯丙氨酸相互作用的荧光光谱特征。三个体系标准曲 线的相关参数为：KT_．D．唧体系线性范围为0．025嵋肺L~2．8p咖L，相关系数 (力为O．9959、KT-．D．1姐体系线性范围为O．050pg／mL~2．5pg