益气养阴法对IgA肾病大鼠AT1和Ⅳ型胶原的影响.pdfVIP

目 录 中文摘要……………………………………………………………………1 英文摘要……………………………………………………………………．．3 研究论文益气养阴法对IgA肾病大鼠ATl和Ⅳ型胶原的影响 前言……………………………………………………………………………………………．7日IJ吾……………………………………………………………………………………………·7 材料与方法………………………………………………………………7 结果…………………………………………………………………………………………··14 8 附图……………………………………………………………………1 附表………………………………………………………………………………………·31 讨{愈…………………………………………………………………………………………··34 结论…………………………………………………………………………………………··40 参考文献………………………………………………………………40 综述IgA肾病发病机制的实验室研究进展……………………………·44 致谢………………………………………………………………………………………………··55 个人简历…………………………………………………………………··56 中文摘要 益气养阴法对IgA肾病大鼠ATl和Ⅳ型胶原的影响 摘 要 诊后20年内进入终末期肾衰竭，严重威胁着患者的身心健康。IgAN在我国 发病率较高，其临床表现多样，以反复发作性血尿为主要特点，可伴有蛋 白尿、高血压等。IgAN的诊断目前主要是依靠病理检查并结合血尿、蛋 白尿等临床表现，其病理特征主要包括肾小球系膜区多聚IgAl分子伴少量 C3、IgM、IgG沉积及系膜细胞增殖、系膜基质的增多。关于其发病机制 仍然知之甚少，许多学者认为其是多种因素综合作用的结果。近年来，细 胞因子的作用引起人们的关注，研究发现肾脏局部的RAS系统激活，可以 刺激系膜细胞增殖、系膜基质增宽及细胞外基质的合成，在IgAN的进展 过程中发挥重要作用。目前IgAN的治疗仅限于对症支持及免疫抑制等治 疗，因此发现有效的特异性治疗方案成为研究热点。因此我们提出“益气 养阴法”治疗IgAN，应用于临床上后取得了不错的治疗效果，但其具体 的治疗作用机制仍然不是很清楚。 本文首先建立IgAN动物模型，应用益气养阴中药按照相应的药物剂 量进行干预治疗。通过观察大鼠24／J,时尿蛋白定量、尿红细胞计数、肾功 能等，同时检测血清中AngII的水平及肾组织ATl、IV型胶原的表达情况， 旨在探讨益气养阴中药治疗IgA肾病的作用机制及药物作用靶点。 方法：40只雄性清洁级SD大鼠被选入实验。我们将这40只大鼠随机 分成正常对照组lO只、模型组lO只、贝那普利组10只、中药组lO只。除正 常对照组外的后三组均运用BSA、脂多糖、蓖麻油、四氯化碳复带IJIgAN 大鼠动物模型。具体方法如下：将免疫原BSA用蒸馏水配制成1009／L浓度， 组给予相同剂量的蒸馏水隔日灌胃8N；每周_次皮下注射生理盐水 0．4ml：第六周尾静脉注射生理盐水0．2ml。然后从第lO周起，贝那普利组、 中药组分别予以盐酸贝那普利、中药灌胃，正常对照组、模型组予以等量 中文摘要 生理盐水灌胃，持续8周。实验过程中，我们将大鼠置于代谢笼内分别于 实验的各个时间点留取尿液标本，测定尿红细胞计数及24d时尿蛋白定 量。实验第17周末，麻醉动物，留取血液标本，迅速采集大鼠肾脏标本。 血液标本离心后用半自动生化仪测定大鼠肾功能及放射免疫法测定血清 II的水平。最后，于光镜、电镜下观察大鼠肾脏组织病理形态学改 ePAng 变，免疫荧光法检测大鼠肾脏IgA免疫复合物沉积，免疫组织化学技术检 测Ⅳ型胶原的表达情况，RT-PCR技术检测ATl的基因表达水平。 结果： 模型组、贝那普利组、中药组大鼠ATI基因表达较正常组明显升高(P O．01)，贝那普利组、中药组大鼠这个指标的表达较模型组有所降低(P O．01)，贝