Dact2在胃中的表观遗传学改变及功能研究.pdf

中文摘要 Dact2在胃癌中的表观遗传学改变及功能研究 研究生于源滋 导师杨云生 中文摘要 背景 胃癌是威胁人类健康的恶性肿瘤性疾病之一，目前在世界范围内位 于癌症相关死亡原因第二位。研究表明，Wnt信号通路的失调与消化道肿 ofB 瘤的发生关系十分密切。Dact(Homosapiensdapper，antagonist Dact3的表达均受到表观遗传学调控，分别在肝癌和结肠癌中通过调控 用文献报道很少。Dact2在胃癌中的表观遗传学变化及与胃癌发生关系至 今尚无报道，能否成为胃癌的候选抑癌基因尚不清楚。 目的本研究旨在检测Dact2在原发性胃癌和胃癌细胞系中的甲基化情况 及表达改变，并结合I临床病理资料探讨Dact2对胃癌早期诊断的临床价值； 研究Dact2在胃癌细胞中的功能，分析其对Wnt信号通路的调控作用，探 讨胃癌发生发展的可能机制。 blot的 方法在7株胃癌细胞系中检测甲基转移酶抑制剂 的表达变化；应用甲基化特异性PCR检测胃癌细胞系和原发性胃癌组织标 周期、迁移的影响；应用荧光素酶报告基因系统，在胃癌细胞系SGC790l 中文摘要 中检测Dact2对Wnt信号通路的调控作用；应用westernblot检测Dact2 的抑癌作用，我们应用裸鼠成瘤实验观察Dact2对肿瘤生长的影响，计算 抑瘤率进行统计学分析。 述8株胃癌细胞去甲基化药物5-aza-dc处理前后Dact2mRNA水平变化， 发现在PHM82和SGC7901中Dact2 正常胃黏膜中未见甲基化改变(0／7例)。为更好的理解Dact2在胃癌发生 隆形成能力及迁徙能力，使细胞停滞在G2／M期，但是其对凋亡无明显作 用。应用双荧光素酶报告基因系统，我们观察到Dact2对Wnt信号通路具 有明显抑制作用。Western blot实验结果示Dact2再表达可能下调下游效 对裸鼠成瘤的影响，发现Dact2能显著抑制活体内肿瘤的生长。 结论Dact2启动子区甲基化是胃癌发生发展中的好发事件，可能参与下 通路抑制作用影响胃癌发生发展，并可能成为诊断胃癌、评估预后的生物 学标记物。 关键词胃肿瘤Dact2表观遗传学甲基化 ofDact2inGastricCancerand Changes Epigenetic Functional Study Doctoralcandidate：YuanziYu Mentor：YunshengYang Abstract Gastriccancerisoneofthemostcommon andthe Background malignancies cancer-related threatstothe 2nd causeof death，whichseriously public leading worldwide．Recentstudieshavedemonstratedthat of health disregulation roles playsimportantdu