G蛋白偶联雌激受体(GPR30)激动剂G-1抑制人主动脉平滑肌细胞迁移作用的研究.pdf

摘要 摘要 目的：血管平滑肌细胞(VSMC)迁移在心血管系统疾病如动脉粥样硬化的发 生、发展以及肿瘤形成中具非常重要作用。雌激素在动脉粥样硬化形成及发展 过程中具重要保护作用。GPR30(G．proteincoupledestrogenreceptor)作为雌激 素受体可被雌激素及其特异性激动剂G．1激活从而调节细胞增殖、迁移等功能。 诱导的VSMC细胞迁移的影响，以及GPR30激活对细胞迁移相关基因MMP2 和MMP9表达及相关信号通路激酶的影响。 方法：采用人主动脉平滑肌细胞系(humanaorticsmoothmusclecell，hASMCs) 为实验用细胞，PDGF．BB作为诱导细胞迁移的外源因子。经划痕试验检测G．1 对细胞迁移作用的影响；通过RT-PCR及Western Blot方法检测GPR30在 hASMCs细胞系中的表达情况；并通过GPR30siRNA干扰方法使GPR30沉默， 验证G．1对细胞迁移作用是否通过GPR30而产生；通过Real．timePCR及 Western 激酶等信号通路是否参与G．1激活GPR30对细胞迁移的影响。 结果：1．G一1抑制PDGF．BB诱导的hASMCs细胞迁移，G．1处理8h后具最佳 抑制效果，并且G．1对细胞迁移的抑制具有浓度依赖性。2．GPR30在hASMCs 细胞中有表达。3．hASMCs细胞中GPR30表达沉默可逆反G．1抑制细胞迁移作 5．PD98059和AGl478不影响G．1对细胞迁移的抑制作用。 达而不影响MMP2表达；G．1不通过激活MAPK、EGFR而抑制细胞的迁移。 G．1 关键词： 细胞迁移GPR30 siRNA干扰 Abstract Abstract ofvascularsmoothmuscle objective：Migration cells involvedin fVSMC)is ofcardiovascular development formation systemdiseases(e．g．atherosclerosis)and of mediatethe of tumors．Estrogens atheroscleroticformation．GPR30 processes beactivated (G。proteincoupledestrogensreceptor)canby its estrogensspecificity to cellular agonist．G-1regulate as and activities，such proliferationmigration．This aimsto the study effectsofGPR30onVSMC theeffect investigate of migration，an