LTP、GAF基因转化甘蓝型油菜及其抗病性的研究.pdf

煎釜：￡7R翻声P基因转化甘蓝型油菜及其抗病性的婴究 ￡限翻印基因转化甘蓝型油菜及其抗病性的研究 摘要 油菜是世界四大油料作物之一，其用途广泛，经济价值高。在中国，油菜菌核病 (Sclerotinia 着生物技术的发展，许多学者通过基因工程的手段研究油菜的抗病性。研究表明，植物脂 Transfer 质转移蛋I刍(Lipid Protein,LTP)、天麻抗真菌蛋I圭t(GastrodiaAntifungalProtein, L．)为试验材料，将￡开和GAFP 抗菌核病的油菜植株，本研究以甘蓝型油菜(Brassicanapus 基因进行农杆菌介导的遗传转化。主要工作和结果如下： l、LTP基因转化甘蓝型油菜 (1)通过改变外植体的培养时间，菌液浓度，培养基的激素配比，培养条件等，优化 了油菜子叶柄遗传转化体系； Tl代植株PCR检测出阳性条带，说明目的基因转入； (3)通过苗期离体叶片菌核病菌丝体接种法，对Tl代植株抗病性进行鉴定，鉴定结果 发现转基因Tl代植株的抗病能力优于对照“扬油6号i (4)草酸是核盘菌的次生代谢物，众多研究证明油菜对草酸的抗性与对病原的抗性一 致。种子萌发能力实验表明，草酸胁迫下转基因Tl代种子发芽率要明显高于对照“扬油6 粤． 。 ’， ● 活性和POD活性(与抗病能力正相关)更高。 2、GH即基因转化甘蓝型油菜 (1)通过探讨下胚轴诱导愈伤组织的影响因素，优化油菜下胚轴转化体系； (2)对To代再生植株进行PCR检测，得到阳性植株10棵： 的基因得到了表达。 关键词：LTP，G■即，甘蓝型油菜，抗病 旦 扬趔太堂亟±堂焦迨塞 IntroductionofLTPandGAFPintoBrassica genes napus ●· ● ● its anodisease resistance Abstract is theworld’Sfour oil oneof thefeatureof Rapeseed majorcrops，with economic value．In sclerotiorumis diseaseof lligll Clfirm,Sclerotiniathemost damgeous andaffects the recent of rapeseed rapeseedproductiongreatly．Inyears，thestrategygenetic has in resistance been withthe of engineeringappliedenhancingrapeseed along development studiesshow Transfer