MAEL基因在腺癌中的表达及相互作用蛋白的筛选.pdf

lIIlillIlllllUl Ull111IllI Y1913039 摘 要 许多肿瘤激活了生殖细胞特异表达基因，这类在多种肿瘤组织中 高表达、但在正常组织中的表达仅限于睾丸的精细胞的基因被称为癌 一睾丸基因。癌一睾丸抗原被广泛用作肿瘤免疫治疗的靶标，也可作为 癌症诊断和预后的分子标志。 已有研究结果表明MAEL基因是一个睾丸生殖细胞特异表达基 因，在睾丸以外的其他正常人体组织中没有表达。本文通过RT—PCR 检测人类五个不同类型的癌细胞系中MAEL的mRNA表达，发现MAEL 程度的表达。MAEL在睾丸和癌细胞中特异表达说明了MAEL是一个癌 ／睾丸基因中的新成员。 为了探究MAEL基因转录调控的机制，本文克隆并分析了MAEL基 用DNA亚硫酸氢盐测序法测定了两种乳腺癌细胞中MAEL基因启动子 的1个GC盒和2个WTl结合位点中的胞嘧啶甲基化程度不同。用 显著提高，这些结果说明MAEL基因的转录受到其基本启动子的甲基 化的调控。 为了研究MAEL在癌症中的作用机制，本文通过免疫共沉淀结合 能与MAEL相互作用的蛋白质进行G0功能注释和聚类分析，结果表明： 从分子功能来看，这些与MAEL相互作用的蛋白多数是RNA结合蛋白和 DNA结合蛋白，从所处的细胞位置来看，这些蛋白多数以核糖核蛋白 的形式存在，位于胞质和线粒体中居多。参与的生物过程主要是RNA 加工和大分子复合物的组装。 本文首次发现睾丸特异表达基因MAEL在癌细胞中的表达，并研 究了MAEL基因的表达调控及筛选了与MAEL蛋白相互作用的蛋白，为进 一步了解癌症发生原因和MAEL基因功能奠定了基础。 关键词：MAEL，乳腺癌，癌一睾丸基因，DNA基化，蛋白质相互作用 Ⅱ ABSTRACT are activatedin germline“。specific Many genesaberrantly various thatare malignancies．Thegenes normallyexpressed in cellsofthe are onlygerm testis，and yet aberrantly of ina humancancersarecalledcancer—。testis expressedrange are as genes．Cancer—testisantigens widelyapplicabletargets forcancer andmolecular markersfor immunotherapy diagnosis and is ofcancer． prognos PreviousstudiesshowedthatMAEL is a gene