TRIM59基敲除导致小鼠原肠运动缺失.pdf

摘要 摘要 鼠基因组中大概有70个基因。TRIM蛋白涉及广泛的生理功能如转录调节，增值， 凋亡，免疫和发育。但具体每一个TRIM蛋白的靶分子及在体内的生理功能仍是 不清楚。 目的：探讨E3泛素连接酶TRIM59在小鼠胚胎发育过程中的作用 组织及胚胎中的表达情况；免疫荧光亚细胞定位：酵母双杂交方法筛选TRIM59 靶分子；基因打靶技术构建基因敲除小鼠；基因组PCR鉴定胚胎基因型作胚胎 致死统计学分析：HE染色分析突变体细胞和组织形态变化；整体原位杂交技术 分析小鼠胚胎标记基因的表达情况。 结构域。RT—PCR结果证实TRIM59在成体组织和胚胎中均表达。亚细胞定位确定 TRIM59在细胞质成簇分布。TRIM59KO能够导致小鼠胚胎致死，统计学分析出 生小鼠基因型比例不符合孟德尔遗传定律。HE结果证实整体突变体小鼠胚胎上 胚层结构紧凑，无中胚层分化。小鼠胚胎整体原位杂交结果显示TRIM59KO小 鼠胚胎无中胚层标记基因T基因的分化，前脏内胚层标记基因Cerl表达减弱， P1scrl相互作用。 结论：TRIM59 KO导致小鼠胚胎致死，表明E3泛素连接酶TRIM59为小鼠胚胎发 育所必须。TRIM59KO小鼠胚胎在发育过程中前脏内胚层Cerl表达量减弱对胚 胎外组织的抑制信号减弱，导致小鼠胚胎图式发育的紊乱不能正常形成胚体。 而TRIM59 KO小鼠胚胎在原肠运动前期和原肠运动过程中上胚层区域减小缺少 足够的细胞数量来完成原肠运动，这可能是小鼠胚胎致死的原因。 关键词：TRIM59，E3泛素连接酶，胚胎致死，原肠运动，原癌基因 Abstract Abstract asanE3 motif aredefined containing(TRIM)proteins Background：netripartite RBCC a TRIM arecharacterizedthe motif,including ligasefamily．Theproteins by andacoiled-coil areabout domain．oneortwoB-boxdomains RING region．There areinvolvedinabroad of inhumansandmice．TRIM range 70members proteins as such biologicalprocesses transcription and substrateofTRIM andtheir proteins immunitydevelopment．However,the invivoremainselusive． function US．Inthis will a functionalidentified