一株鞘氨醇单胞TP-5产生的韦兰胶及其性质研究.pdf

摘要 摘要 韦兰胶具有较高的剪切稀化性及优良的流变性能，主要作为增稠剂、悬浮 剂、乳化剂、稳定剂、润滑剂、成膜剂和粘合剂应用于工农业的各个方面。特 别是在食品、混凝土、石油、油墨等工业中有广泛的应用前景。鞘氨醇单胞菌 TP．5(Sphingomonassp．TP．5．)能合成微生物胞外多糖韦兰胶(welangum)。本文 优化了韦兰胶的发酵培养基，研究了韦兰胶的流变学性质及与其他胶复配的凝 胶特性，并验证了韦兰胶合成关键基因UDP．葡萄糖脱氢酶基因(ugdG)的功能。 以发酵产量、糖转化率、粘度为指标，采用单因素实验和响应面法对菌株 TP．5合成韦兰胶的发酵条件进行优化。在发酵培养基为蔗糖47．59／L、NaN03 2H20 4．5∥L、玉米浆1．09／L、MgS04O．3∥L、Na2HP04·15．759／L、CaC031．59／L、 蔗糖转化率达到50．96％，糖转化率提高42％。 韦兰胶水溶液具有良好的耐温性和耐酸碱性。与黄原胶(xanthan gum)、结 bean 冷胶(geIlangum)、瓜尔豆胶(guargum)或槐豆胶(10custgum)等生物 胶复配后，能增加后者的粘度和耐温性。不同比例复配胶的粘度随温度的不同 而变化。 韦兰胶与结冷胶复配，在结冷胶浓度大于60％时，加热到85℃以上，可以 形成凝胶。韦兰胶与结冷胶或黄原胶复配，结冷胶或黄原胶浓度大于20％，在 加入大于的0．01mol／L CrCl3时，可以形成凝胶。此外还研究了韦兰胶与其它胶 复配，加热或加入CrCl3形成凝胶后，不同加热温度或不同CrCl3浓度所形成的 各配比复配胶的凝胶特性。 克隆了菌株TP．5的UDP．葡萄糖脱氢酶基因(ugdG)，表达及纯化了重组的 UDP．葡萄糖脱氢酶。研究了菌株TP．5中ugdG编码的UDP．葡萄糖脱氢酶 (切)PG．DH)的生化特征及生物学功能，证明编码的UDPG．DH具有葡萄糖脱 氢酶的活性，能催化UDP．葡萄糖转变为UDP．葡萄糖醛酸。生化分析表明，菌 株TP．5的UDP．葡萄糖脱氢酶酶活较高。当底物为UDP．葡萄糖时，Km值为0．86 mM。 mM；当底物为NAD+时，Kin值为0．36 关键词：鞘氨醇单胞菌韦兰胶培养基优化质构性质复配ugdG Abstract microbial wdan sp．TP-5synthesise Sphingomonas exopolysaccharidesgum．In this USe factor and surfacemethodto paper，wesingle experimentsresponse optimize thefermentationconditionsofstrain fermentation TP一5，according yield，sugar conversionrateandadhesivenessindex．ThefermentationmediumisSucrose47．5 4．5 ∥L、NaN03g／L、MgS040．3∥L、Na2HP04·12H205．759／L、CaC031．59／L、 FeS040．0059／L、0．0111steepliquor1．09／L．And increased polysaccharideproduction from the fermentationof to