SQS1基因在南芥发育过程中的功能研究.pdf

摘要 摘要 固醇是真核生物膜的重要组分。植物中含有多种固醇，其中含量丰富的为 谷甾醇、菜油甾醇和豆甾醇。植物固醇具有非常重要的作用：一方面固醇是构 成生物膜的脂质成分；另一方面，固醇可以作为固醇类激素合成的前体；此外， 固醇本身也具有信号分子的功能。 鲨烯合酶(SQS)是植物固醇合成途径中的一个关键酶。在拟南芥中有两个 鲨烯合酶的编码基因(SQSl、sQs2)，这两个基因在四号染色体上串联排列， T．DNA 其中只有SQSl能够编码有活性的鲨烯合酶。本实验室筛选到了两个SQSl 插入突变倒]r,sqsl．J／+及s筘J一2件。研究表明，这两个突变体均是纯合体胚致死的。 通过组织透明观察发geAsqsl．．f胚发育停滞在球形胚时期之前。本研究通过回补实 验证明-：sqsl．珀勺表型缺陷确实是I扫SQSl基因的突变造成的。通过对转基因植物 SQSl．GUS组织化学染色观察发现，sQsl几乎在拟南芥的所有组织表达，而在分 裂增殖较活跃的组织(根尖、侧根原基、茎端分生组织、花序和胚胎)及维管 组织中表达较强。通过对转基因植物SQSl．EGFP进行荧光观察发现，SQSl定位 于细胞的内质网(ER)。另外，本研究运用RNA干扰技术得到TSQSI弱表达的 转基因株系SQSlRNAi。SQSl弱表达株系的表型明显，即植株矮小，分枝较多， 主枝不明显，叶片卷曲、出现坏死斑点，在花序的幼嫩部分有黄化的现象。通 过半定量RT-PCR检测发现在弱表达株系中SQSl的表达量出现不同程度的下调， 表明该弱表达株系的表型是由于SQSl的敲减造成的。 上述的研究表明，SQSl在拟南芥的生长发育过程中发挥重要的作用。SQSl 对于细胞的正常分裂和伸长是必需的，并在胚胎的正常发育过程中发挥重要作 用。 关键词：拟南芥，植物固醇，鲨烯，鲨烯合酶 Abstract Abstract Sterolsare of membrane．Plantcellscontain importantcomponentseukaryotic diversesterols and as sterol includingsitosterol，campesterolstigmasterol major areessentialtothe and of components．Phytosterols growthdevelopmentplants．They constitute of membranesandserveas forthe components biological precursors ofother metabolites．In alsocanactasa biosynthesis addition，phytosterolssignaling molecule． consideredtobea in Squalenesynthase(SQS)is keyenzyme phytosterols isencodedtwo and biosy