中国东海可培养生物多样性研究及多相分类学鉴定.pdf

＼I㈣96㈣07{Y1211116帅 摘要 采用不同培养方法对我国东海14个站点可培养微生物多样性进行了调查，通过16S rRNA基因分析确定微生物所属类群，分析不同海域微生物组成结构特点，并初步探讨 人类活动对海洋微生物的影响。并对菌株Za3．36．11’和Za3．19进行多相分类学研究，根 据生理生化、化学和基因型特征确定此二株菌的微生物分类单位。 rDNA序列测定结果表明 通过分离培养方法，共获得海洋微生物纯菌396株，16S 分离菌株属于4个门，9个纲的146个微生物物种，有32株与最相近的微生物有效种的 16S rDNA序列相似性低于98％，表明中国东海海域有着丰富的微生物多样性和大量的 微生物未知物种资源。分离菌株中丫．变形菌纲微生物占64％，仅．变形菌纲微生物占18％， 厚壁菌门微生物占15％，拟杆菌门和放线菌门微生物所占数量不足3％。与大陆不同距 离的各区域微生物类群所占比例、微生物多样性和丰富度均有所不同。从本研究可知， 近岸海域芽孢杆菌的数量远高于远海地区，这可能与该类微生物抵抗外界有害因子能力 较强有关。同时，在近海水域分离得到的多株微生物与有机污染物降解和重金属吸收转 化等有关，另一些微生物倾向于出现在远离大陆的海区，这些微生物可能对水体环境有 较为苛刻的要求。 根据16SrRNA基因序列比对结果，菌株Za3．36．1 ACAM 或O．5．7．5％(w／v)海盐下生长，无氯化钠或海盐情况下未见生长。生长的pH范围为 6．0．10．0，温度范围4℃．32℃。本研究利用API r 和Za3．19糖醇利用、酶学性质和产酸特性进行分析，检测到该两个菌株具有p．葡萄糖 甙酶、碱性磷酸盐酶、酯酶(C4)、 类脂酯酶(c8)、白氨酸芳胺酶、胰凝乳蛋白酶、酸 性磷酸酶、萘酚．AS．BI．磷酸水解酶和氧化酶活性，可利用葡萄糖、肌醇、山梨醇、鼠李 糖、蔗糖、密二糖、苦杏仁苷、阿拉伯糖、麦芽糖和己二酸作为碳源。不产生H2S，不 古霉素、红霉素、利福平、氟哌酸、多粘菌素、庆大霉素、新霉素、氯霉素和新生霉素 InFeature 表现出抗性，而对链霉素和四环素敏感。菌株Za3．36．11‘脂肪酸主要成分为Sum 15：o 3(C16：Ic07c和／或iso．C G+C含量为42．8％，菌株Za3．19 和Za3-19定为Glaciecola属新的分类单元，命名为Glaciecola donghaiensissp．nov．· 关键词：中国东海，微生物多样性，多相分类学，16SrRNA基因，新种 11 ABSTRACT meEastChinaSeawas methods． Bacterial of14sitesof culture-dependent diversity investigatedby activitiesonmebacteriaWas studiedandcharacteristicsofbacteria The ofhuman primarily impact areaswere and studied communitiesindifferent strains，Za3-36·ITZa3—19，wereby