木霉诱导黄瓜对霉病的系统抗性及其机理研究.pdfVIP

摘 要 木霉(TrichDderma spp．)是一种重要的生防真菌，在农作物病害的生物防治中起着 举足轻重的作用。大量研究表明，木霉的拮抗机制具有多样性，除了对许多病原菌具有 竞争作用、重寄生作用和抗生作用，并有研究指出木霉具有诱导植物产生系统抗病性的 作用。目前，有关木霉诱导抗性机制的研究已经取得了一定进展，但是还不够完善。深 入研究木霉的诱导抗性机制有助于构建高效的生防木霉菌株，生产出效果优良的木霉菌 剂，从而更有利于植物病害的防治。因此，本研究论文通过生物模型筛选出具有诱导植 物产生系统抗性能力的木霉菌株，并进行鉴定，对其防病机理进行了研究，初步构建了 木霉诱导抗性体系。 本文采用植物生测法从本实验室保存的具有拮抗作用的木霉菌株中筛选出对黄瓜 灰霉病具有诱导系统抗性的菌株。研究结果显示：不同木霉菌株诱导处理黄瓜幼苗根部 后，对黄瓜狄霉病(叶面病害)的相对防病效果存在显著性差异。其中，木霉Tr-28和 rDNA分子学鉴定方 瓜狄霉病具有较强的诱导系统抗性的作用。通过形态学观察和ITS 法对上述两株木霉菌株进行菌种鉴定，结合两种鉴定方法，得出木霉Tr．28和Tr．92在 atr01，iride的亲缘关系很近，鉴定孩株菌 形念学上与木霉属一致，Tr．92与Trichoderma 为TrichodermClatrovi，一ide，而木霉Tr．28鉴定为木霉属。 木霉Tr一28和Tr一92诱导处理黄瓜幼苗根部后，测定诱导处理不同时间后黄瓜叶片、 茎、根不同组织部位中POD、PPO、PAL、几丁质酶和p．1，3一葡聚糖酶的酶活性变化。 聚糖酶活性均显著高于对照组。其中Tr一28诱导处理黄瓜幼苗叶片组织中POD、PPO、 8、1．50、1．1 葡聚糖酶活性的峰值分别是对照处理的1．30、1．1 8、1．02倍。Tl‘一92诱导处 1．70、2．23、1．23、1．01倍。通过比较两株木霉对黄瓜幼苗不同组织部位中相关防御酶系 及其病程相关蛋白酶的诱导作用，木霉Tr-92具有相对稳定的诱导作用。 通过对黄瓜叶片中POD同工酶和病程相关蛋白(PRs)电泳图谱分析，得知木霉Tr-92 诱导处理黄瓜根部后，黄瓜叶片中POD同工酶和病程相关蛋白的表达量发生了变化。 结果表明，在木霉Tr-92诱导作用下，黄瓜叶片中出现了POD同工酶的新酶带，并且主 酶带的颜色和带型比对照组加深加宽，说明木霉Tr一92处理黄瓜根部，能够诱导黄瓜叶 片中POD同工酶表达量的增加；诱导处理后黄瓜叶片中病程相关蛋白条带增多，表明 木霉Tr-92能够诱导黄瓜体内潜在的防御基因的表达。 通过对黄瓜根细胞的超微结构进行透射电镜观察，结果表明：木霉Tr-92能够穿透 根的表皮细胞，进入细胞排列紧密的内皮层，在黄瓜根组织表皮组织中细胞生存，使细 胞壁中木质素和胼胝质物质大量积累，增强了细胞对外界病原菌的抵抗能力，从丽减少 了病原菌对其的侵害作用。 通过研究不同浓度木霉孢子悬浮液诱导、不同的旋入方式及不同诱导}．白j隔时间等因 素对木霉诱导黄瓜抗灰霉病能力的影响，初步构建木霉诱导黄瓜抗狄霉病的技术体系， 结果表明，在黄瓜幼苗一叶一心期根部接种浓度为106cfu／mL木霉孢子悬浮液3d后进行 挑战接种灰葡萄孢病原菌，黄瓜幼苗的抗病能力最强。 关键词：黄瓜灰霉病木霉诱导系统抗性防御酶系POD同工酶PR技术体系 Abstract controlwhichan biologicalfungi play important nic矗DdPr，咒口(Trichodermaspp．)are thatthe