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树状大分子包裹的纳米金颗粒作为非病毒载体用于基因传递的研究 树状大分子包裹的纳米金颗粒作为非病毒载体用于基因传 递的研究 摘要 基因治疗是一种通过将体外的核酸物质作为药物输送到特定的 细胞或组织来修复体内缺陷基因而达到治疗疾病目的的一种医疗手 段，可以用来治疗常见的帕金森综合症、囊肿性纤维化、严重联合免 疫缺陷病和癌症等由于基因紊乱所导致的疾病。基因治疗成功的关键 是发展出一种具有高效特异性和靶向性并且不产生任何毒副作用的 理想载体，从而将DNA安全的转移至靶细胞核内进行表达。 众所周知，基因传递系统包括病毒和非病毒载体系统，病毒载体 在不同的细胞系中都表现出了比较高的转染表达效率，但是病毒载体 由于其细胞毒性、致癌性以及免疫源性等安全性问题而限制了它在临 床上的应用。非病毒载体具有安全性高、制备简单和装载量大等优点， 因此，非病毒载体成为了人们新的选择。目前，在基因传递领域发展 高效低毒的非病毒载体仍然是一个非常具有挑战性的研究工作。 在本文工作中，我们报道了一种基于聚酰胺胺(n蝴AM)树状 DENPs)， 大分子的新型基因载体即树状大分子包裹的纳米金颗粒(Au 并将没有包裹纳米金的的树状大分子作为对照来研究内部的纳米金 粒子的有无以及大小对基因转染效率的影响。 本课题主要包含以下研究内容：首先，以5代P枷AM为模板 树状大分子包裹的纳米金颗粒作为非病毒载体用于基因传递的研究 合成了不同氯金酸／树状大分子摩尔比的树状大分子包裹的纳米金颗 粒AuDENPs，然后在不同的N／P比下与质粒DNA复合形成不同的 Au DENPs／pDNA复合物，并通过凝胶阻滞实验和细胞毒性实验对材 对载体的转染效率以及细胞内吞效率和胞内定位进行了系统的研究。 结果表明：Au DENPs不仅可以高效地压缩pDNA，而且可以大大提 高了基因转染的效率，在N／P为2．5时包金量为1：25的D肿s比不 包金的P删AM转染效率提高了百倍以上，这为DENPs作为高效的 基因载体在不同生物医学方向上的应用奠定了基础。 关键词：PAMAM树状大分子，纳米金颗粒，基因传递，转染效率 II 树状大分子包裹的纳米金颗粒作为非病毒载体用于基因传递的研究 ———————————————————————————————————————一 DENDRIMER-ENTRAPPED GoLD NANoPARTICLES ASA NoNVIRAL VECToRFoR GENE DELIVERY APPLICATION ABSTRACT Gene isa ther印y tecllIliqueuSing nucleic foreignther印euIic as acid(suchplasmid， MinjVectorDNAor medicine siRNA)as themtocertain by cells0rtissuesto deli