水稻谷氧还蛋白因OsGRX20的功能研究.pdfVIP

IIIIIIIIIIIIII IIl 0IIIIII III TheFunctionof GlutaredoxinGeneOsGRX20in analysis Rice A Dissertation Submi仕edtothe Committeeof Normal Zhej iang University Forthe of Degree Masterof Science Xi ByNing SupervisedbyYangLing May,2014 V 万方数据 摘要 当植物受到胁迫时，通常会产生大量活性氧，适量的活性氧利于植物正常的生命代 谢活动，但当大量的活性氧积累时会对植物造成氧化胁迫，影响植物的生长发育。植物 GRXs)则是其中一类能清除活性氧的蛋白。谷氧还蛋白是一类谷胱甘肽依赖的氧化还 原酶，参与了细胞中各类生命进程。近年来，在各类植物中已经研究和克隆了一些谷氧 还蛋白基因。本实验室前期以抗病新种质SH5为材料，通过蛋白质双向电泳技术，鉴定 结果如下： 甘肽结合位点，属于典型的亚类I(CPYC)型谷氧还蛋自； 2．对水稻品种SH5进行生物(白叶枯病菌侵染)和多种非生物胁迫(高盐、干旱、 低温和氧化胁迫)，这种在不同胁迫下进行OsGRX20基因的表达特征分析结果表明， 多种胁迫能够诱导OsGRX20基因的表达： 3．实时荧光定量PCR分析表明，傀僦D基因主要在水稻叶片中表达，在茎和根 中不表达或者表达量很少。克隆该基因的启动子，并与GUS报告基因融合构建载体进 行转基因，发现所检测的水稻各器官中，只有水稻叶片能够被染色； 4．构建OsGRX20基因超表达和干扰载体进行转基因，并对转基因株系进行各类胁 长度并无明显的变化。然而，在NaCI和甲基紫精处理下，干扰转基因株系的存活率明 显比野生型的低。干旱处理转基因水稻后与野生型对比并无明显变化。不同浓度氯化钠 处理对种子型萌发率研究表明，在盐胁迫处理3d后干扰株系SH5．5种子的萌发率要低 于野生型SH5和转空载体株系，表明在一定盐浓度范围内，干扰OsGRX20基因的表达 抑制了盐胁迫下水稻种子的萌发率。 关键词：谷氧还蛋白；生物和非生物胁迫：基因表达：转基因 万方数据 Abstract Plantscan a amountofreactive are large oxygenspecies(ROS)whenthey produce