横头山地区苏云芽胞杆菌的筛选鉴定及杀虫活性分析.pdfVIP

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2017-08-29 发布于贵州
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横头山地区苏云芽胞杆菌的筛选鉴定及杀虫活性分析.pdf

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目录 ●I 目录中文摘要…………………………………………………………………………………………I 英文摘要…………………………………………………………………………………………II 1前言…………………………………………………………………………………………………………………………．1 1．1苏云金芽胞杆菌…………………………………………………………………………．1 1．2苏云金芽胞杆菌的活性因子……………………………………………………………．．2 1．2．1杀虫晶体蛋白…………………………………………………………………………一2 1．2．2营养期杀虫蛋白………………………………………………………………………7 I．2．3几丁质酶……………………………………………………………………………．1l 1．2．4群体感应内酯酶……………………………………………………………………．11 1．3杀虫蛋白与其它物质问的增效…………………………………………………………11 1．3．1杀虫晶体蛋白之间的互作……………………………………………………………11 1．3．2 Cryl与Vip3A之间的增效……………………………………………………………12 1．3．3碱性几丁质酶的增效作用…………………………………………………………．．12 1．4杀虫蛋白的应用…………………………………………………………………………12 1．4．1Bt杀虫剂……………………………………………………………………………．12 1．4．2cry基因在转基因植物中的应用……………………………………………………13 1．5杀虫蛋白应用中遇到的问题……………………………………………………………14 1．6本研究中涉及的重要农业害虫…………………………………………………………15 1．6．1甜菜夜蛾……………………………………………………………………………一15 1．6．2亚洲玉米螟…………………………………………………………………………．16 1．6．3大猿叶甲……………………………………………………………………………17 1．7本研究的立题依据和目的意义…………………………………………………………17 2材料与方法…………………………………………………………………………………．18 2．1实验材料与试剂…………………………………………………………………………18 2．1．1菌株与质粒…………………………………………………………………………．18 2。1．2酶及生化试剂………………………………………………………………………．18 2．1．3PCR引物及序列………………………………………………………………………19 2．1．4培养基………………………………………………………………………………．20 2．1．5抗生素………………………………………………………………………………21 2．1．6标准分子量…………………………………………………………………………．21 2．1．7仪器设备……………………………………………………………………………．2l 2．1．8常用溶液与缓冲液…………………………………………………………………．．22 2．1．9供试昆虫……………………………………………………………………………24 2．2实验方法………………………………………………………………………………．．25 2．2．1菌株的分离……………………………………………………………………………25 I 东j匕农业大学理学硕士学位论文 2．2．2晶体形态观察………………………………………………………………………．25 2．2．3Bt基因组的提取……………………………………………………………………25 2．2．4Bt菌株的多样性分析………………………………………………………………．26 2．2．5PCR初级模板的制备……………………………………