油菜抗旱指标筛及抗旱相关基因的表达分析.pdfVIP

摘 要 油菜是我国重要的油料作物之一。干旱是严重影响油菜生长、限制油菜产量的主要 因素。鉴定和培育抗旱品种是减少干旱造成生产损失的有效途径之一。本实验对20个不 同来源甘蓝型油菜品种(系)分别在芽期和苗期进行干旱处理，并对各生育期形态及生理 生化等性状特征进行了系统研究和分析，初步建立了油菜芽期和苗期抗旱性鉴定指标体 系。 芽期实验中，我们以20个油菜品种（系）为材料，用不同浓度（0、5 ％、10％、15 ％、20 ％）的PEG-6000高渗透溶液对油菜幼苗进行模拟干旱胁迫处理。综合考虑根长、 芽长、总苗长、根冠比、根鲜重、芽鲜重、总鲜重、根干重、芽干重、总干重共10个指 标，发现20% PEG-6000浓度处理下各指标值与对照之间呈现显著性差异，同时在此浓 度下各指标相对值在不同品种之间呈现出最大的变异系数，因此我们认为20% 的 PEG-6000为油菜芽期耐旱性鉴定的最适处理浓度，从而建立了油菜室内PEG-6000模拟 干旱体系。在20% 的PEG-6000处理浓度下，芽期油菜在根、芽长度及鲜重指标值显著降 低，根冠比及干重显著升高。脯氨酸含量、可溶性蛋白含量、超氧化物岐化酶（SOD） 酶活性、过氧化氢酶（CAT ）酶活性相对值与油菜芽期生理总抗旱级别呈显著或极显著 相关。主成分分析表明，芽苗总长，总鲜重，总干重、脯氨酸含量及SOD酶活性相对值 5个指标可作为芽期油菜抗旱的鉴定指标。 在水分胁迫下，苗期油菜叶片中脯氨酸含量、可溶性蛋白含量、抗坏血酸过氧化物 酶（APX ）活性、过氧化物酶(POD)活性、SOD酶活性、CAT酶活性6个生理指标均显著 升高。运用隶属函数综合评判法将各生理指标结合在一起对苗期油菜抗旱性进行综合评 价，并结合相关性分析表明， APX酶活性、SOD酶活性、CAT酶活性及可溶性蛋白含 量与油菜的抗旱性显著相关，可作为苗期油菜抗旱性鉴定指标。对以上4个指标进行回 归分析，建立苗期抗旱性鉴定的数学模型：Y=-1.059+0.281x +0.776x +0.112x （式中： 1 2 3 Y代表抗旱总级别D值，x1 、x2 、x3分别代表APX活性、SOD活性、可溶性蛋白含量相 对值）。运用该数学模型可对不同油菜品种苗期抗旱性进行辅助预测。 水分胁迫下植物通过降低叶片气孔蒸腾来减少体内水分散失而增强抗旱性，水分的 蒸腾散失会带走热量而使叶面温度下降。本实验利用远红外成像技术检测水分胁迫下油 菜叶面温度变化。实验结果表明，水分胁迫条件下抗旱性强的品种叶面温度高于抗旱性 III 弱的品种。 干旱成活率实验结果表明，在严重干旱条件下，实验前期筛选到的苗期抗旱性强的 品种3、4 、10、16号具有较高的存活率，抗旱性弱的品种15、20号的存活率较低，从而 证明前期油菜抗旱性鉴定方法是可行的。 水分胁迫下，与拟南芥NCED3 、CBF3、ADH1 、ABA2 基因类似的油菜基因表达量 均有所上升，这些基因可能与油菜芽期抗旱性有关。但基因的克隆与抗旱分子机制有待 进一步研究。 关键字：甘蓝型油菜，抗旱性，鉴定指标，RT-PCR IV ABSTRACT Rapeseed is one of the major oilseed crops in China. Drought is the key environmental factors restricting rapesseed growth and its yield. Breeding for drought-tolerant varieties is one of the most efficient way to alleviate yield reduction caused by drought stress. 20 rapeseed cultivars (Brassica napus L.) are s