水稻OsSID407基因和OsNLRP5基因的功能研究.pdfVIP

厦门大学硕士论文2012 摘要 植物在应对自然环境中的各种生物与非生物的胁迫反应调控中涉及到多种 复杂的信号传导途径包括各种蛋白间和蛋白与其它小分子的相互作用：在研究水 稻应对生物胁迫的分子机理过程中，通过分析细条菌侵染水稻植株差异表达的蛋 白，我们分离了两个与水稻抗病反应相关基因，一个是编码删一，如蛋白的 仇舭剐町基因；另一个是DUFl644基因家族，编码I斟G／U．box蛋白的 仍瓯DP卯7限I】0，z：RF2)基因。本研究对这两个基因的功能开展了相关研究工作。 仍删卯7基因位于水稻第2号染色体上，含有1个内含子和2个外显子， 全长3．21Kb，包含一个1086bp的开放阅读框，编码362个氨基酸的蛋白，该蛋 病信号分子能诱导仍删幻7的表达；另外，NaCl和PEG也能诱导仍删4D7 的表达，在水稻与细条菌的互作反应中侥御卯7表现出明显的上调表达。为 了进一步研究伪＆D尸4D7在水稻抗病反应中的功能，我们通过农杆菌介导的水 稻遗传转化技术将仍龇DM7基因整合到水稻的染色体上；Q．PCR分析筛选到 3株目的基因的表达水平明显高于野生型(达100．200倍)的过量表达植株和3 株表达水平明显低于野生型(最低可达0．1倍)的抑制表达植株；对转基因植株 进行接菌(细条茵)实验，发现过量表达植株的抗性明显增强，而抑制表达植株 的抗性相对降低，且在过量表达抗性增强的植株中，水稻防御相关M破er基因 ，倥4、艘5和尸次J『p上调表达。这些结果表明，仍僦D：ⅣD7基因可能参与到与细 条菌的免疫反应中。 伽剐町基因位于水稻第5号染色体上，由1个外显子组成，全长为282lbp， 含有NB．√6眦和LI汛结构域。伽剧巧基因在水稻中的表达具有组织特异性： 在幼根、叶和叶鞘中表达量高，而在茎中较低。Q．PCR分析表明，H202、ABA、 SA和MeJA等抗病信号分子能诱导呲即5基因的表达，在水稻与细条菌的互 作中删兄阿基因被抑制表达，通过水稻遗传转化技术获得104棵过量表达转 一基因植株；Q．PCR结果表明在随机挑选的8株过量植株中有2株的僦即5基 厦门大学硕士论文2012 因的表达水平达到50倍以上，在购买的呲尉町基因的突变体植株中有3株的 表达水平低于0．5倍。在伽剐百基因的过量转基因或突变体植株中防御相关 Marker基因尸R彳、徘5、j慢JD、jv：2哩J和尉rⅣ事．，而诒基因都被不同程度的上调或 下调表达。这些结果表明，呲剧町基因编码的NBS．LI汛类蛋白在水稻的抗病 反应网络中发挥作用。 关键字：水稻；抗病；细条菌 U 厦门大学硕士论文2012 Abstract botll abitotics仃essesin to biotic觚d then删 re‘’poIlse Wh肌plaIlts of def-ense envir0Inent，regulation many re啪Ilsesrequirescornplicatedsi91laling illteratiollsbeteween between pathwaynetwotkS，including protei璐or proteins锄d othersmall t量le咖diesofmoleculemechallisma．bouttllerice molecules．During de矗mceinduced by肠胛肪D，，zD麟删p哏卿z记D肠∞∥，twodi脑entially C蝌己尉町锄d仇聊卯7、№reiS0lateda11d expressedproteills identified弱 de