水稻miR15基因克隆及其功能初步分析.pdfVIP

水稻m诹156基因克隆及其功能初步分析 摘要 的小l蝌A。它通过与靶基因RNA分子互补配对来识别并指导靶基因的切割或抑 制靶基因的翻译，从而调节真核生物生长发育。miRl56是一个十分保守的植物 和9条染色体上。为了探索miRl56在水稻病毒致病和水稻生长发育过程中的功 基因序列为骨架，构建了抑制miRl56功能的植物转化载体，然后通过农杆菌介 导法遗传转化水稻愈伤组织，并获得转基因水稻植株。分子鉴定显示所转外源目 的基因已稳定地整合到转基因水稻染色体中并在转基因植株中高水平表达。与对 照相比，过量表达miRl56的转基因植株在To代即表现出植株明显矮缩，分蘖增 加，开花延迟，结实率极低或不结实等表型。 过量表达miRl56的转基因水稻 种子小，内颖有较长的芒，且脊线处无颖毛，发芽较慢，芽的生长很慢等异常性 状。通过半薄切片观察发现过量表达miRl56b水稻植株整体发育程度低于对照 植株。通过qRT．PCR分析发现，在过量表达miRl56b的转基因水稻植株中， miRl56b的靶基因SPL(sqlla|nlosa 不同程度的影响，同时水稻体内其它一些miI斟A的表达量也受到影响，譬如 发育过程和水稻病毒致病过程中的功能打下了基础。 关键词：水稻m诹156；载体构建；转基因水稻 摘要 CLONINGAND PRⅡ，MINARyFUNCTIONANAIYSISOF RICE MⅡt156 ABSTRACT ofsmall 2Intill miRNAs，a勺巾enon—C0dingIⅢAs(aboutsize)，c强礁glllatc eXprcssion mI斟A 56 gcne bymedi撕ng de伊ad撕on is觚cient趾dconServedin h嬲12 缅mily plant．Thef．锄ily m锄bers(miRl56a-1)， iIlchromosome in and9 riCe discover respectiVely出stributed1，2，4，5，6，8 plants．To t11erol豁ofmiRl56inme of订ce the growⅡl觚d developmentplants觚d of miRl56 were cloncd矗Iomrice riceⅥmses，也e pamogcneSis genes firstly p1粕ts andthen 300s0matVe咖rs Os-miRl56 ligatI。d缸opl锄id pCAMB认1 contailling wereconS仃1l∞ed珊der也e鼬l0f 1 genes w硒cloncd‰订cells。d弱a gene pl觚ts柚d backbonef．0rsynthetizingta玛et