番茄耐热种质资的筛选及苗期耐热相关基因的分离.pdfVIP

Y1 番茄耐热种质资源的筛选及苗期耐热相关基因的分离 摘要 番茄弛归印e瑙玉∞刀嚣伽彪一纵研Mill)是最重要的蔬菜作物之一，在人们生活中 占有重要的地位。番茄是喜温植物，但不耐高温。长期高温逆境下生长，常伴随 着产量、抗逆性、抗病性下降和商品性差等现象的发生。随着全球温室效应的增 加，气候逐渐变暖，番茄耐热育种越来越受到了人们的重视，番茄耐高温研究已 经成为当前番茄研究的一个热点。本文以10份番茄为材料，通过统计高温胁迫 下坐果率筛选出耐热番茄和热敏感番茄各2份。测定这4份番茄材料的电解质渗 透率和叶绿素荧光参数，筛选番茄耐热性鉴定指标：并通过cDNA—AFLP技术分 离耐热相关基因，为番茄苗期耐高温研究奠定了基础，为番茄耐高温育种提供了 理论依据。本论文的研究内容及结果如下： 1、高温会造成花粉活力下降，从而影响授粉不良，受精过程紊乱，产生畸 形果，甚至落花落果。因此，本实验通过统计高温胁迫下的番茄坐果率来衡量番 茄高温耐受能力。本实验于2009年6．8月在浙江省农业科学院杨渡试验基地的 温室大棚内进行。统计10份番茄材料不同时期的坐果率，发现‘CLN．2413R’ 率较低，低于1％。坐果率与番茄的耐热性成显著正相关。 ‘9185’为材料，通过测定高温胁迫下苗期番茄电解质渗透率(EC)和相对电 解质渗透率(EC％)，并与高温胁迫下番茄坐果率进行相关性分析，发现高温胁 番茄耐热性鉴定指标。 3、利用FM．2便携式荧光仪测定上述4份番茄材料在高温胁迫下的叶绿素 下的坐果率相关系数达到0．9以上(|RI0．9)，即相关性显著，可以用来辅助番茄 耐热性的鉴定。 摘要 4、应用CDNA—AFLP技术研究了高温胁迫下耐热番茄‘CU寸-2413R’和热 敏感番茄‘9246’苗期叶片基因差异表达情况，共分离出12条与耐热相关的基 比对，4条基因与番茄热传导系数有关；1条基因与真核生物中的荧光素酶同源 性较高；1条基因是番茄染色体上的序列；2条基因是番茄苹果酸酶的序列；其 余4条基因BLAST比对与已知序列没有较高的同源性。并利用实时荧光定量 够大量表达以此适应高温逆境。 关键字：番茄；耐热：坐果率；叶绿素荧光参数；电解质渗透率；相关性；基 因差异表达 H ABSTRACT SCREENINGOFHEAT-RESIST久NTGERMPLASMAND ISOLATIONOFHEAT-RESISl’ANTI辽LATEDGENEATTHE SEEDINGSTAGEINT0Ⅳ【ATO ABSTRACT Tbmal0isoneoftllemost and t0 impoltantVcgctablecropsbelongsth黜l叩hilic leadst0lossof and plant．Und盱hi幽temperature，tom咖oft既produc_tion t0dise弱e．As也eillcre嬲eof rese缸Chin susc印tiple 910balw黝ing，h髓t—resiStant tomatoh筋be∞a h嬲becomea in也eresearChof uniVersal内cIls，锄d hotspot “)ma：t0． hl吐lis oft、)lro tomato嚣(heat·r嚣iStant粗d papere郅ch heat-susc印tipletomato懿) were