灭活轮状病毒与活肠道病毒71型联合疫苗的制备及其免疫效果评价.pdfVIP

目 录 摘要……………………………………………………………………………………………………………………．1 前言……………………………………………………………………………………………………．44fjU吾……………………………………………………………………………………………………………………． 第一部分…………………………………………………………………………………．9 轮状病毒灭活疫苗的制备………………………………………………………………．9 一、实验材料……………………………………………………………………………．9 二、实验方法……………………………………………………………………………10 三、结果与分析…………………………………………………………………………17 四、讨论…………………………………………………………………………………21 第二部分…………………………………………………………………………………23 肠道病毒71型灭活疫苗的制备………………………………………………………．23 一、实验材料……………………………………………………………………………23 二、实验方法……………………………………………………………………………24 三、结果与分析…………………………………………………………………………29 四、讨论…………………………………………………………………………………32 第三部分…………………………………………………………………………………33 灭活轮状病毒与灭活肠道病毒71型联合疫苗的制备………………………………．33 及其免疫效果评价………………………………………………………………………33 一、实验材料……………………………………………………………………………33 二、实验方法……………………………………………………………………………34 三、结果与分析…………………………………………………………………………37 四、讨论…………………………………………………………………………………38 ，J、结…………………………………………………………………………………………………………………．．39 展望………………………………………………………………………………………40 参考文献…………………………………………………………………………………41 附录………………………………………………………………………………………47 致谢………………………………………………………………………………………52 研究生简历………………………………………………………………………………54 独创性声明………………………………………………………………………………55 中国医学科学院／；lls京协和医学院医学生物学研究所硕士学位论文 摘要 轮状病毒(Rotavirus，RV)是世界范围内引起婴幼儿腹泻最主要的病原体之一， 几乎所有5岁以内的儿童都感染过RV，估计全球每年约有60万婴幼儿因RV感染 腹泻而死亡。肠道病毒71型(Enterovirus71，EV71)是一种高度嗜神经肠道病毒， EV71感染对象主要为5岁以下的儿童。目前已知EV71的感染可以导致手足口病， 由此引起的神经源性肺水肿、无菌性脑膜炎和脊髓灰质炎样的麻痹是患儿死亡主要 病症。RV与EV71的感染都可以采用疫苗预防，目前国内外市场上的RV疫苗均为 口服减毒活疫苗，EV71为灭活疫苗，EV71灭活疫苗已将于近期投入市场。新疫苗 的研发与使用将使更多的传染病得到预防和控制，同时也会带来免疫接种次数增 多，受种者经济负担和精神负担增加，降低有效接种等问题。因此，世界卫生组织 倡导研制联合疫苗以最大限度减少上述问题的发生。 本文以研究联合疫苗基础问题为目的，旨在评价灭活RV与灭活EV71联合疫 苗的免疫效果及两种抗原之间的相互作用。实验性疫苗包括单价RV和EV71疫苗 及灭活轮状病毒与灭活肠道病毒71型疫苗按不同抗原含量组合配比制成的联合疫 苗，三种疫苗分别免疫ICR小鼠。两次免疫后的各实验组血清样品用血清中和实验 分别检测血清中抗EV71与抗RV的抗体效价。实验结果发现，EV71初次免疫后， 各实验组小鼠抗体阳转率为83％～100％，几何平均效价为4．O～7．1，加强免疫后为 67％，几何平均效价平均值为2．6，加强免疫后为100％，几何平均效价平均值为31．2。 想的抗RV抗体及抗EV71抗体