生物分离用羧甲基壳聚糖(CMCTS)磁性纳米复合物制备表征.pdfVIP

生物分离用羧甲基壳聚糖 （CMCTS）磁性纳米复合物的 制备与表征 1 2 夏金兰 ，廖鹏飞 ，聂珍媛，王晶，肖水明 （中南大学资源加工与生物工程学院 中国 长沙 410083） E-mail ：jlxia@ 摘 要：首先采用改进的共沉淀法制备四氧化三铁磁性纳米粒子, 然后通过一步包埋法，将 磁性纳米粒子用天然多糖物质－羧甲基壳聚糖（CMCTS）进行直接包覆，制备出羧甲基壳聚 糖磁性纳米复合物。透射电镜和粒度分析结果表明，该磁性纳米复合物基本呈单分散、球状、 粒度分布比较窄、平均粒径约为 12nm。FT-IR图谱和热重分析表明Fe O 表面成功地包覆了羧 3 4 甲基壳聚糖。将该磁性纳米复合物应用于鸡血细胞基因组DNA的分离，实验结果显示：该磁 性纳米复合物非常适合于基因组DNA的分离纯化，避免了传统苯酚－氯仿法中有毒试剂的使 用，能够显著简化整个DNA的纯化制备过程，是一种很有发展前景的基因组DNA分离的方法。 关键词：磁性纳米粒子； 磁性纳米复合物；羧甲基壳聚糖；基因组 DNA 分离 1. 引言 磁性吸附剂或载体以微球、纳米复合物或表面化学修饰过的纳米粒子等形式出现时，由 于磁性载体的粒径小、比表面积大，容易与目标物质结合。它们在生物分离的众多领域中有 着广泛的应用前景。如生物大分子的分离与纯化；细胞和细胞器的分离。同时，由于磁性吸 附剂或载体的磁响应性、纳米尺寸效应和对靶向物质特异性吸附，它们能通过外加磁场作定 向分离，不需要离心操作，从而使相关的生物分离纯化过程简化，并且有利于实现实验的自 动化操作[1-9] 。 随着分子生物学、基因诊断和治疗技术的发展，有关快速、高效、可靠、无毒的核酸制 备方法和分析技术越来越受到重视。传统的核酸分离方法存在严重的不足，如使用有毒试剂 （苯酚、氯仿）、耗时等。表面修饰的磁性纳米吸附剂或载体可克服这些不足，因而在该领 域显示出了极大的应用前景。近年来的研究表明，通过无机或有机聚合物进行表面修饰和包 覆的磁性纳微米级粒子在核酸分离的应用领域的研究活跃。二氧化硅包覆的磁珠[10]、聚乙 烯醇[11]、甲基丙烯酸聚合物磁性微球[12-13]便是该类典型的核酸分离载体。 值得注意的是一些天然的多糖高分子化合物，如褐藻酸，壳聚糖，由于其良好的生物相 容性和井然有序的活性基团，可以用于修饰磁性颗粒用于DNA 的分离的应用。最近， Prodělaloύ J等[14] 采用天然羧基多糖高分子化合物-褐藻酸修饰钴铁氧体磁性纳米粒子，制 备出微米级复合物作为DNA分离载体成功的应用于鸡血细胞DNA 的分离。 Chang Y-C 等 [15，16]研究了利用碳二亚胺使壳聚糖通过化学健结合在Fe O 磁性纳米粒子表面，制备出 3 4 单分散性的羧甲基壳聚糖-Fe O 磁性纳米粒子，并将其应用于Cu (II)、Co(II) 的吸附。本文， 3 4 我们通过一步包埋法，将磁性纳米粒子与天然多糖高分子物质－羧甲基壳聚糖（CMCTS ） 第一作者：夏金兰(1964-)，男，教授，博士生导师；电话：0731-8836944 ；E –mail ：jlxia@m 。 第二作者：廖鹏飞(1980-), 男，硕士研究生；E –mail ：lfp_1980@163.com -1- 通过静电吸引直接进行包覆，制备出羧甲基壳聚糖磁性纳米复合物，并将该复合纳米粒子应 用于鸡血基因组DNA 的分离。据我们所知，这种