IMP--4型金属β内酰胺酶合并膜孔蛋白OmpK36缺失引起肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素高水平耐药.pdfVIP

生堡撞验匡堂盘查垫!Q生!旦筮!!鲞筮!翅堡丛!』!生丛鲤：墅出坐垒望垫!Q：!尘：塑：塑垒! ·845· ．临床实验诊断研究· IMP-4型金属13内酰胺酶合并膜孔蛋白 OmpK36缺失引起肺炎克雷伯菌对 碳青霉烯类抗生素高水平耐药 张嵘蔡加昌 胡云建周宏伟 陈功祥 【摘要】 目的研究临床分离的肺炎克雷伯菌z4和Z5对碳青霉烯类抗生素耐药的分子机制。 方法2008年从卫生部北京医院的急诊室和神经内科患者的痰标本分别分离到2株对碳青霉烯类 抗生素不敏感的肺炎克雷伯菌z4和z5。测定菌株MIC，对菌株进行质粒接合试验、质粒消除试验、B 内酰胺酶IEF分析、PCR扩增和DNA序列分析以及外膜蛋白分析。结果亚胺培南、美罗培南和厄 他培南对z4和z5的MIC分别为32、32和256鹇／IIll以及1、l和2∥IIIl。接合试验可使受体菌大 肠埃希菌对碳青霉烯的MIC值从≤0．0625或0．125t,eC,,a上升到1或2t墉,／ml。PCR扩增和序列分 析发现Z4产IMP-4型金属B内酰胺酶、TEM一1型和SHV．1型广谱B内酰胺酶；Z5产IMP-4、TEM-1 和SHV．12型超广谱B内酰胺酶；2株细菌的转移接合子均只产IMP-4。质粒消除试验发现Z5的 IMP-4质粒消除株(TEM．1和SHV．12阳性)对碳青霉烯类抗生素敏感，而z4的IMP-4质粒消除株 (SHV．I阳性)对碳青霉烯类抗生索敏感性降低(亚胺培南、美罗培南和厄他培南MIC分别为0．25、 000 0．5和4u∥“)。z4和Z5的b／alMP-4基因均位于大小约55bp质粒的I类整合子上。外膜蛋白 的SDS．PAGE和ompK35／36基因序列分析发现z4由于ompK36基因中存在点突变(CAG突变为 TAG)造成基因表达提前终止而导致OmpK36膜孔蛋白缺失。结论质粒介导的IMP-4型金属B内 酰胺酶的产生或B内酰胺酶的产生合并OmpK36膜孔蛋白缺失均可引起肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类 抗生素敏感性降低，IMP-4合并OmpK36膜孔蛋白缺失则可导致肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素 高水平耐药。 【关键词】克雷伯菌，肺炎；卡巴配能类；抗药性，细菌；13内酰胺酶类；孔蛋白质类 The of resistanceinKlebsiella isduetothecombination high．1evelcarbapenem presence pneumoniae of眦P．4 and metallo—g-lactamaseporinOmpK36deficiency‘ZHANG舶ng，CAI肋-chang，ⅣU Yun-jian，ZHOUⅣo昭-wei，CHENGo昭一xiang．‘cfinicalLaboratoryCenter，2“AffiliatedHospitalof ZhejiangUniversity。Hangzhou310009，China Correspondingatah07：Z删，vG砌增，Email：brigitte_zx@163．corn To mechanismsof resistanceinKlebsiella 【Abstract】Objectiveinvestigate carbapenem Z5 from Two KlebsieUa z4and isolated pneumoniae．Methodscarbapenem．non．susceptiblepneum∞niae of Were dilutionmethod． in2008were antibioticsdetermined BeiiingHospital investigated．MICs byagar