副猪嗜血杆菌外蛋白表型及免疫原性的初步研究.pdfVIP

lIIII I I II IIIIIIII I I IIl Y1746789 摘要 摘要 副猪嗜血杆菌是定居在猪上呼吸道的正常菌群，在特定条件下能引起猪的 革拉瑟氏病(Glasser’sdisease)，该病以多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎及高发 病率、高死亡率为特征，给世界养猪业带来了巨大经济损失。研究副猪嗜血杆 菌的流行病学特性，了解该菌外膜蛋白的差异，揭示毒力因子与毒株之间的关 系，对于探索致病机理和为该疾病的免疫预防提供理论依据具有重要的理论意 义和实践意义。 本研究对分离自江西、广东和上海三省市的82个副猪嗜血杆菌野外分离株 个分离株的OMP指纹图谱进行了扫描分析；根据扫描数据，采用SPSS16．0软 件进行了聚类分析。同时制备了5株强毒力的野外分离株的多克隆高免血清， 通过免疫印迹进行了副猪嗜血杆菌OMP与全菌体蛋白的免疫原性试验，探讨菌 株之间的交叉免疫效应，寻找具有共同抗原决定簇的免疫原性蛋白等研究。主 要结果如下： 1．运用十二烷基肌胺酸钠法成功制各了副猪嗜血杆菌的OMP。 综合直观分析、聚类分析和免疫学分析，结果显示：副猪嗜血杆菌的OMP表型 分为以36-40KD蛋白为特征的PAGEII型和缺乏该特征蛋白的PAGEI型； 约 34％患病猪分离株属于PAGEII型，只有约9％健康猪分离株属于该型，表明 3640KD蛋白可能与毒力相关。 3．制备的5株副猪嗜血杆菌多克隆高免血清可与同株菌株的OMP起显著的 白的多种成分呈明显免疫反应。 4．5种抗血清对来自不同临床背景的分离株具有良好的交叉免疫反应，但 免疫效应存在着差异。患病猪分离株的OMP和全菌体蛋白均具有强免疫原性， 而健康猪分离株的OMP免疫原性比全菌体蛋白弱。另外，患病猪分离株OMP Ⅱ 摘要 的免疫原性较健康猪分离株的强。由此推测副猪嗜血杆菌分离株之间的交叉免 疫反应可能与临床背景相关。 27～31KD蛋白成分，该两种蛋白具有良好的免疫原性，可考虑作为候选疫苗。 关键词：副猪嗜血杆菌；外膜蛋白；毒力因子；免疫原性 III Abstract ABSTRACT isacommensalcolonizedonthe Haemophilusparasuis organism upper respiratory tract of cancause pigs，which Glassefsdiseasecharacterized bypolyserositis， and with and ina polyarthritis condition． meningitishighmobiditymortality special The diseasehasmadea economiclosses to allovertheworld．Itis huge pigindustry in and