乳腺癌细胞增殖和凋亡相关microRNA的筛选.pdf

摘要 摘要 肿瘤是难以治愈的疾病。目前对肿瘤的治疗主要是通过外科手术切除，以 及放疗或化疗等方法，但目前尚无法根治。乳腺癌是一种女性常见的肿瘤，在 恶性肿瘤女性患者中，乳腺癌的发病率高居第一。目前已有越来越多的研究发现 癌基因在乳腺癌的发生、发展中起着非常重要的作用，它们可能调控着癌细胞 3’非翻译区 度约22个核苷酸，广泛存在于真核生物中，主要通过与靶mIⅢA 完全或部分互补结合，导致靶mIⅢA降解或转录后翻译抑制，从而调控靶基因 的表达。鉴定能够对乳腺癌关键癌基因起调控作用的microI矾A，对乳腺癌的治 疗有着重要的作用。 导的真核细胞表达系统过表达特定miI矾A，检测对MCF．7细胞系的增殖具有抑 制作用的microI斟A。实验主要分为4个部分： 1． 上分别进行了靶预测，选择靶基因中富集了参与调控细胞增殖和细胞生长 2． 段，将两条链退火后，酶联到pL、，X．sl州A2慢病毒表达载体上。 3． 利用磷酸钙法，在293T细胞中包装病毒，将包装好的病毒感染人乳腺癌细 胞系MCF．7。 4． 感染病毒后，通过CCK8法检测特定miRNA表达对MCF．7的抑制作用， 并结合细胞增殖相关的基因的表达情况，以确定miRNA对细胞增殖的影响 及其作用机制。 关键词：乳腺癌；microRNA；细胞增殖 Abstract Abstract mataredimcultto tlle of Cancersareclassofdiseases cure．A10ng谢mprocess suchaS aIld mediciIle metllods science，some exahsis，radiotller印y tller印eutic since were to缸℃atcancer．Butitishardtoeradicatecancer chemoⅡlerapydeveloped ceUdeam．BreaStc龇1ceris t：heir aIldresis切nceof liIIlitless replicativepotential haSralll(edⅡlefirst infemale the breastcallcer common patients，aIldmobidi够of thef-emaLlecancer rolesof in aI】ld 锄ong patients．Theoncogenestumorigenesis cancerarerevealedinthe could tlle ofbreast decades，tlleyregulate development past callcercells．MicroRNAisa