水曲柳愈伤组织诱导及悬浮细胞体系的建立（原版论文）.pdfVIP

中国摩学通提 2013，29(25)：21—25 ChineseAgriculturalScienceBulletin 水 曲柳愈伤组织诱导及悬浮细胞体系的建立 丁小萌，闰俊崎，周 博，齐凤慧，詹亚光 (东北林业大学生命科学学院，哈尔滨 150040) 摘 要：建立快速稳定生长的水曲柳(Fraxinusmandshurica．)悬浮细胞系，为进一步诱导水曲柳体细胞胚 及大规模生产次生代谢产物香豆素类物质奠定基础。以水曲柳叶柄为外植体，进行愈伤组织诱导，选择 松散的愈伤组织，接种到含2，4．D不同浓度的WPM液体培养基中进行悬浮细胞体系的建立。以水曲柳 叶柄为外植体，通过对BA和NAA不同浓度组合实验表明：WPM+0．5mg／LBA+1．0mgL／NAA+20g／L 蔗糖+5．4g／L琼脂是诱导水曲柳疏松愈伤组织适合的培养基。将疏松的愈伤组织接种到BA和2，4-D不 同浓度组合的培养基中，结果显示，WPM+0．1mgL／BA+0．15ms／L2,4．D+20s／L蔗糖是水曲柳悬浮细胞 生长最快的培养基。细胞生长曲线呈 “S”型，生长周期为18天。初始接种量为1．5e~25mL时细胞增重 最快。建立了快速稳定生长的水曲柳悬浮细胞系，最佳继代周期为15天。 关键词：水曲柳；悬浮细胞；细胞培养 中图分类号：$722．3 文献标志码 ：A 论文编号：2013．0689 CallusInductionandEstablishmentofCellSuspensionCultureSystem forFraxinusm andshurica． DingXiaomeng，YanJunqi，ZhouBo，QiFenghui，ZhanYaguang (SchoolofL Sciences，Nonhe~tForestryUniversity，Harbin150040) Abstract：Establishingofmanchurianash(Fraxinusmandshuflea．．)suspensioncelllineswithfastandstable growth，andpavingthewayforsomaticembryoinductionandmassproductionofsecondarymetabolitesof coumarinmaterialinthefuture．Petioleswereusedastheexplantstoinducecalli．Loosecalliwereinoculated into liquidWPM mediacontainingdifferent2．4一D concentration toestablish suspension eellsystem．The optimummediatoinducecallifrompetioleswasWPM+0．5mg／LBA+1．0mg／LNAA+20gLsucrose+5．4s／L AGAR．whichdeterminedbydifferentcombinationsofBA andNAA．Theloosecalliwereinoculatedintothe WPM media supplementedwith thedifferentcombinationsof2．．4一D andBA。theresultsshowedthatthe medium WPM +0．1mg／LBA+O．15mg／L 2,4-D+20g／Lsucrosewasthemedium togrow fastestforash suspensioncells．Undersuchcondition，thecellsgrewinan S‘’CUrve，withacycleof18d．Thecellsweighted fastestwith theoriginaldosageof1．5g／25mLcalli．A manchurianashsuspensioncelllineswithfastand stablegrowthhadbeenestablished，with