rAAV2介导hBDNF基因联合游泳训练对脊髓损伤大鼠治疗作用的实验的研究.pdf

rAAV2 介导 hBDNF 基因联合游泳训练对脊髓损伤大鼠治疗作用的实验研究 中文摘要 中文摘要 研究目的：1、构建以绿色荧光蛋白基因（Green fluorescence protein，GFP ） 为报告基因并携带人脑源性神经营养因子（Brain-derived neurotrophic factor,BDNF ） 基因的 2 型重组腺相关病毒载体（rAAV2-BDNF-GFP ）。2 、大鼠脊髓损伤造模成 功后，对其进行基因治疗和游泳康复训练，通过对其行为学、组织学和免疫组织 化学的分析评价，以及与单一干预方法之间的比较，探讨基因治疗联合游泳康复 训练对脊髓损伤的保护作用和影响。 研究方法：1、以原有质粒 pTRGDNFGFP 为模板，构建含有人 BDNF cDNA 片段的重组质粒 pTRBDNFGFP 并与 AAV 病毒包装质粒 pAAV-RC 、pHelper 用 PEI 法共转染 HEK293T 细胞。包装获得表达 BDNF 的 2 型重组腺相关病毒载体 （rAAV2-BDNF-GFP ）。2 、采用“氯仿处理-PEG/Nacl 沉淀-氯仿抽提”3