两株狂犬病病毒糖蛋白的杆状病毒表达及免疫原性的研究.pdf

目 录 前 言 1 第一篇 研究内容3 第一章 狂犬病病毒糖蛋白基因重组杆状病毒的构建及鉴定3 1 材料与方法3 1.1 材料3 1.2 方法6 2 结果 16 2.1 狂犬病病毒SRV9、BD06 株糖蛋白基因的扩增 16 2.2 重组供体质粒酶切鉴定 16 2.3 重组穿梭质粒的PCR 鉴定 17 2.4 重组杆状病毒的获得 18 2.5 重组杆状病毒的鉴定 18 3 讨论21 4 小结23 第二章 重组杆状病毒表达的狂犬病病毒糖蛋白的免疫原性研究26 1 材料与方法26 1.1 材料26 1.2 方法26 2 结果27 2.1 小鼠免疫后抗体水平27 2.2 攻毒保护试验29 3 讨论29 4 小结30 第二篇 文献综述32 第一章 狂犬病病毒分子生物学研究进展32 第二章 杆状病毒载体研究进展42 个人简历52 致 谢58 英文缩写词表 英文缩写 英文全称 中文全称及注释 Dulbecco’s modified minimal essential 细胞培养基 DMEM medium CVS Challenge virus standard 标准攻击毒 FAVN Fluorescent antibody virus neutralization 荧光抗体病毒中和试验 BHK-21 Baby hamster kidney-21 幼仓鼠肾细胞-21 株 CPE Cytopathic effect 细胞病变效应 Tris Tris- （hydroxymethyl ）-aminomethane 三羟甲基氨基甲烷 LD50 50% lethal dose 小鼠半数致死量 TCID50 50%tissue culture infective dose 半数组织培养物感染量 IU International unit 国际单位 Reverse transcription polymerase chain RT-PCR 反转录聚合酶链式反应 reaction PBS Phosphate-buffered saline 磷酸盐缓冲液 MOI Multiplicity of infection 感染复数 I.C. Intracerebral 脑内（接种途径） dNTP Deoxynucleoside triphosphate 脱氧三磷酸核苷 bp Base pair 碱基对 LB Luria-Bertani （broth ） LB 培养基 pfu Plaque forming units 噬斑形成单位 两株狂犬病病毒糖蛋白的杆状病毒表达及其免疫原性研究 中文摘要 狂犬病是指由狂犬病病毒 （rabies virus,RV ）感染动物机体而引起的一种以 脑脊髓炎为主要病理特征，以神经症状为主要临床表现的人兽共患传染病。古埃 及时代该传染病就已经开始流行，直到2012 年，全球范围内仍有90 多个国家或 地区发生狂犬病。近十年来，全球每年约有