表达猪轮状病毒VP7与NSP4-VP7基因重组干酪乳杆菌构建及免疫学评价.pdfVIP

摘要 摘 要 猪轮状病毒(PorcineRotavirus，PRv)属呼肠孤病毒科，轮状病毒属，是引起仔猪病毒 性的腹泻的主要病原之一，该病毒主要经消化道感染。4周龄以内的仔猪发病率可高达80％， 死亡率可达到20％，给我国的养猪业带来了严重的危害和经济损失。近些年的研究表明猪轮 状病毒非结构蛋白NSP4在病毒复制和致病过程中起着重要的作用，研究此蛋白的生物学功 能对于防治此病具有重要意义。 本实验中利用大肠杆菌系统可溶表达了猪轮状病毒弱毒株JL94非结构蛋白NSP4的截短 片段l 白分别腹腔注射小鼠，以PBS作为空白对照，于不同时间点观察小鼠腹泻情况，记录小鼠体 重变化，对比突变前后该蛋白致腹泻能力的变化，结果表明突变后的蛋白致腹泻能力有明显 增强。 casei393作为递呈抗原的活菌载体，利用猪轮 在此基础上，以干酪乳杆菌Lactobacillus 状病毒主要免疫保护性抗原基因VP7主要中和位点和突变前NSP4为靶基因，定向插入到干 索NSP4在干酪乳杆菌表达系统中能否起到免疫佐剂作用，实验将小鼠分为4组，以PBS作 为空白对照组，用重组菌El服免疫小鼠，共免疫3次。免疫后于第1、2、3、5、7、9d采集