大菱鲆(Scophthalmus+maximus)肝细胞体外培养、红体病虹彩病毒体外繁殖条件及病毒疫苗研制和研究.pdf

大菱鲆(Scophthalmusm锨砌螂)肝细胞体外培养、红体 病虹彩病毒体外繁殖条件及病毒疫苗研制的研究 摘要 大菱鲆(Scophthalmus 宝鱼”，是重要的海水经济增养殖鱼类之一。近年来，由于环境污染的日益加剧 和养殖业的过度膨胀，各种传染性疾病尤其是病毒病开始广泛传播，病毒性疾病 危害最大，并且极难防治。大菱鲆红体病是近年来对大菱鲆养殖业危害较大的一 rddish iridovirus， 种病毒性疾病，其病原为大菱鲆红体病虹彩病毒(Turbotbody TRBIV)。大菱鲆死亡率逐年上升，。给大菱鲆养殖业带来了巨大的经济损失。从 根本上解决和预防大菱鲆病毒病的关键是要查清病毒的感染途径、感染机理以及 研制病毒疫苗对大菱鲆进行免疫预防，而建立新的大菱鲆细胞系是进行病毒研究 的理想体外研究体系和制备病毒疫苗的有效方法。 本文采用胰蛋白酶、透明质酸酶和II型胶原酶消化法成功启动了大菱鲆肝组 织的原代培养，原代培养启动一周后，组织块周围即有大量的细胞迁出，形成明 显的生长晕，30天后便可长成细胞单层。通过比较DMEM／F一12和L．15两种培养 液，发现DMEM／F一1