苏云金芽孢杆菌NU-1、NU-2毒力提高与保护研究.pdf

摘要 本实验研究了苏云金杆菌NU—l、NU一2毒力的提高与保护。 研究了NU一1、NU一2的菌种培养、种子培养，筛选了适宜的培养条件；出于 工业化生产的目的，利用正交方法优化筛选了发酵培养基，并测定了晶体蛋白含 量。结论为：菌种培养72 h，采用1号种子培养基，4％接种量，种子培养7h， NU。l在2号、10号发酵培养基上，NU．2在4号发酵培养基上发酵结果最高。 发酵42h，菌数达到78．0X 了进一步研究NU一1、NU．2的生长情况，还测定了其生长和pH曲线。 筛选出两种添加剂，试验了它们对Bt发酵的影响。结果表明：添加剂1号 和添加剂2号都能提高Bt的发酵菌数并缩短发酵时间。 采用不同防腐剂处理Bt制剂，研究了防腐剂的防腐效果。试验结果表明防 腐剂l号，2号都是良好的防腐剂，防腐剂1号用量0．15％，防腐剂2号用量0．04％ 就可取得理想的防腐效果。 用SDS．PAGE、酶活测定、电镜观察等方法研究了紫外线照射对Bt的破坏， 并初步探寻了保护方法。结果表明；紫外线照射能破坏晶体蛋白的表面结构和形 态，照射24h后，酶活性几乎全部丧失，SDS显示晶体蛋白几乎完全不溶。 添加0，5％苋菜红做保护剂，再经紫外线照射后，酶活降低较小，电泳显示伴孢 晶体碱溶产生的135KD和65KD原毒素蛋白几乎无变化，证明染料类是较好的 保护剂。 关键词：苏云金芽孢杆菌，毒力，提高与保护，发酵，晶体蛋白 荣经作耆、导师同意 细垒文公布 Abstract Themain ofthe isthe topic paper increaseand of oftwo protection toxicity and strains，NU-1NU-2，ofBacillus thuringiensis． Thecultureofstrainsandseeds was tO researchedscreenoutthe ofNU—l，NU一2 culture suitable condition．The to wastestedselect orthogonalexperiment thebest medium．The and fermentation was its was crystal measured， proteinpurified density Nolseed Resultshowed：whenthe inoculationof hours’culture medium，the 4％，72 and7hours’cultureofseedwere fermentat