电针及和bFCF合用对脑缺血所致神经细胞死亡的影响.pdf

1中文摘要 电针及其与bFGF合用对脑缺血所致 神经细胞死亡的影响 脑缺血可引起神经细胞坏死和凋亡，延迟性神经细胞死亡(以 凋亡为主)，对于梗塞灶的扩展起到非常重要的作用。凋亡相关基 因蛋白(Bcl．2、Bax、P53)参与细胞凋亡的调控过程。针刺疗法作 为我国传统医学的瑰宝，其神经保护作用已得到确证。它作用于多 环节、多靶点，在缺血后可进一步上调神经营养因子(如bFGF) 的表达是其作用之一。本工作采用短暂脑缺血再灌注模型，TUNEL、 免疫组织化学等实验技术，观察不同时程凋亡相关基因蛋白的表达 情况及与DNA双链断裂(细胞凋亡的标志之一)之间的关系，探 讨缺血性神经细胞死亡的机制；并分别及合并观察电针和bFGF对 于缺血性神经细胞死亡的作用及对于凋亡相关基因蛋白(Bcl．2、 Bax、P53)表达的影响，并在此基础上对电针和bFGF合用时的脑 保护作用加以探讨。 (‘实验结果如下： 1)缺血2小时后再灌，随着再灌时间的延长(24、48、72小 时)，梗塞灶从纹状体扩展到深皮质、直至浅皮质，而缺血侧存活 细胞的比例逐渐降低，细胞形态也越来越不正常，各组之间有统计 学差异。在不同再灌时间点，缺血侧纹状体TUNEL阳性细胞的百 分率变化不大，各组之间无统计学差异。而缺血侧皮质TUNEL阳 随着再灌时间的增加，TUNEL阳性细胞在皮质的比例逐渐增加， 且各组之间有显著差异。在不同再灌时间点，各组Bcl．2均在缺血 侧皮质有少量表达，且随再灌时间的增加，表达逐渐减少，在缺血 核心区纹状体无表达。Bax的表达部位与Bcl．2相似，但随再灌时 间的增加，阳性细胞的比例逐渐增加，且在缺血核心区也有少量表 达。Bcl．2／Bax逐渐减小，而P53在缺血侧皮质的表达逐渐增加，与 相同部位TUNEL阳性细胞的比例增加相对应。 2)电针组与各对应的单纯缺血组相比，可显著减小梗塞灶面积， 在再灌24小时组电针可增加缺血侧纹状体细胞存活，减小TUNEL FEt,}生细胞的比例；在再灌48、72小时组增加缺血侧皮质存活细胞， 减小TUNEL阳性细胞的比例，但并不能改善梗塞灶核心区纹状体 的细胞存活和DNA双链断裂的发生。电针还可相对于各单纯缺血 组上调Bcl．2／Bax，减小P53阳性细胞的比例。 3)bFGF与盐水组相比，梗塞灶面积显著减小，局限于纹状体； 缺血侧纹状体细胞存活明显增加，TUNELPEl,『生细胞的比例明显降 侧皮质的表达。 4)电针与bFGF合用时，梗塞灶面积、TUNEL阳性细胞的比例 相对于电针组和bFGF组均显著减小，有统计学意义；而在缺血侧 细胞存活这项指标上，针药组明显高于电针组和bFGF组。针药组 在缺血侧皮质Bcl．2／Bax与电针组和bFGF组相比有升高的趋势，而 P53的表达有减少的趋势，但并无统计学差别。 小结： 1)短暂脑缺血再灌注可引起延迟性神经细胞死亡，这对于梗 塞灶的扩展起到重要作用。Bcl．2家族成员Bel一2和Bax之间的比值 决定细胞凋亡的发生，P53参与缺血性神经细胞凋亡的过程。 2)电针可限制梗塞灶的扩展，减少短暂脑缺血再灌注后细胞 坏死和凋亡，它可能通过上调Bel．2／Bax，和减少P53的表述而发挥 作用。 3)外源性给予bFGF有明显减少缺血性神经细胞死亡的作用， 其部分作用可能与上调Bel．2／Bax，和减少P53的表达有关。 4)电针和bFGF合用可比单独使用电针和bFGF时的神经细胞 保护作用明显增强，其作用似并非完全通过调节凋亡相关基因蛋白 - (Bcl．2、Bax、P53)的表达而实现。|J一 关键词：短暂脑缺血再灌注， 电针，bFGF，延迟性神经细胞死 细胞凋亡。 亡，针药合用，Bel．2，Bax，P53， 2．Abstract bFGFon and ofEAand TheEffectsofEA aCombination DeathCerebrallschemian． Neuron