《蛇床子素对神经干细胞体外分化的影响2016年论文》.pdfVIP

· 856 · HeraldofMedicineVo1．34No．7July2015 蛇床子素对神经干细胞体外分化的影响：l： 李少恒，胡昱，姚璎珈，教亚男，孔亮，杨青平，陶震宇，杨静娴 (辽宁中医药大学研究生院，大连 116600) 摘 要 目的 探讨蛇床子素 (Ost)对神经干细胞 (NSCs)分化的影响及机制。方法 体外分离并培养新生小鼠脑 源NSCs，免疫细胞化学法鉴定；取第5代NSCs置于含不同浓度 (O，1O，50，100tzmol·L )Ost的分化培养液中，免疫荧光 细胞化学法检测NSCs分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞情况；RT—PCR检测Notch1基因及其靶基 因Mash1 和 Neurogenin2(Nng2)表达情况。结果 免疫荧光细胞化学法显示神经球显 Nestin／Sox2阳性 ，即所培养 的细胞为 NSCs；Ost可促进 NSCs更多地向神经元(P0．01)和少突胶质细胞 (PO．05)分化，而非星形胶质细胞。Ost可减少Notch 1(P0．01)并增加Ngn2(PO．01)mRNA表达，其中以Ost100Ixmol·L 组最明显。结论 Ost可促使 NSCs更多地向 神经元和少突胶质细胞分化，其机制可能与Ost抑制Notch信号通路有关。 关键词 蛇床子素；神经干细胞；分化 ；Notch信号通路 中图分类号 R285．5；R965 文献标识码 A 文章编号 1004—0781(2015)07—0856—05 EffectsofOstholeonDifferentiationofNeuralStem Cellsinvitro LIShaoheng，HUYu，YAOYingjia，JIAOYanan，KONGLiang，YANGQingping，TAOZhenyu，YANGJingxian (GraduateSchool，LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Dalian116600，C ina) ABSTRACT Objective Toinvestigatetheeffectsofostholeonneuralstemcells(NSCs)differentiationandexplorethe potentialmechanism． Methods Brain—derivedNSCsfrom newbornmicewereisolatedandculturedinvitroanddeterminedby immunofluorescence．TheP5generationsofNSCswereplacedinculturesolutionwithostholeatconcentrationsof(0，10，50， 100 mol·L )．Theneuron，astrocyteandoligodendrogliacelldifferentiationweredetemr inedbyimmunonuorescence．The mRNAexpressionofNotch1anditstargetgenesMash1nadNeurogenin2(Ngn2)wereassessedbyRT-PCR． Results The neurospheredisplayedNestinandSox2-postivebyimmunofluorescence，suggestingthattheculturedcellswereNSCs．Osthole promotedNSCsdifferentiatingintomoreneuron(P0．01)andoligodendrocyte(P0．05)，butnotastrocyte．Meanwhile，osthote significantlyreducedthemRNAexpressionofNotch1(P0．01)andincreasedNgn2(P0．01)atthedoseof100Ixmol·L一． Conclusion Ostholeenhna cesNSCsdifferentiatingintom