云南松GA20氧化酶基因的克隆与表达分析.pdfVIP

第45卷第1期西南林业大学学报Vol.45No.1

2025年1月JOURNALOFSOUTHWESTFORESTRYUNIVERSITYJan.2025

云南松GA20氧化酶基因的克隆与表达分析

李瑞连1,2王玉倩1,2母德锦1.2徐骏飞1,2蔡年辉1,2许玉兰1,2陈林1,2

（1.西南林业大学西南山地森林资源保育与利用教育部重点实验室，云南昆明650233；2.西南林业大学

西南地区生物多样性保育国家林业和草原局重点实验室，云南昆明650233）

摘要：为探讨外源赤霉素对云南松生长发育的影响，及关键合成酶基因GA20ox的表达分析，选用

云南松幼苗为材料，分别以100、200、300mg/L浓度梯度赤霉素及赤霉素抑制剂多效唑进行外源喷

施处理，观察其苗高、地径变化；同时通过对云南松转录组数据的筛选、比对，获得1条

GA20ox基因的同源序列，利用RT-PCR技术进行基因克隆，并进行生物信息学分析、密码子偏好

性分析和基因表达分析。结果表明：不同浓度梯度下，外源200mg/L赤霉素显著促进云南松苗高生

长，而100mg/L赤霉素则显著促进其地径生长。通过克隆所得的云南松GA20x(PyGA20ox)基因

GenBank登录号为OR651279，其编码区长度为1107bp，编码368个氨基酸，理论相对分子质量

为41.7kDa。密码子偏好性分析表明，该基因偏好使用以A/U结尾的密码子，酵母适合作为该基因

微生物异源表达受体，烟草和拟南芥均适合作为该基因遗传转化及功能研究的受体材料。荧光定量

PCR结果显示，PyGA20ox在根、茎、叶以及茎尖均有表达，且相对在茎中显著表达，而不同植物生

长调节剂处理下该基因表达模式不同。综上所述，通过外源植物生长调节剂处理确定了赤霉素对云

南松生长的显著促进作用，适宜喷施浓度为200mg/L，并对赤霉素生物合成途径中的关键酶

PyGA20ox进行了克隆与表达分析。

关键词：云南松；植物生长调节剂处理；基因克隆；密码子偏好性；表达分析

中图分类号：S791.257文献标志码：A

引文格式：李瑞连，王玉倩，母德锦，等.云南松GA20氧化酶基因的克隆与表达分析[].西南林业大学学报（自

然科学),2025,45(1):55-67.LiRL,WangYQ,MuDJ,etal.CloningandExpressionAnalysisofGA20Oxidase

GeneinPinusyunnanensis[JJ.JournalofSouthwestForestryUniversity,2025,45(1):55-67.DOI:10.11929/j.swfu.

202402027

202402027

CloningandExpressionAnalysisofGA20OxidaseGenein

Pinusyunnanensis

LiRuilian-2,WangYuqian-2,MuDejin-2,XuJunfeil-2,CaiNianhu-,XuYulan-2,ChenLinl.2

(1.TheKeyLaboratoryofMinistryofEducationonForestResourcesConservationandUtilizationintheSouthwestMountainsofChina,Southwest

ForestryUniversity,KunmingYunnan650233,China;2.KeyLaboratoryofNationalForestryandGrassland

AdministrationonBiodiversityConservationinSouthwestChina