ATP敏感的钾通道开放剂对离体肺保护的试验研究.pdfVIP

ATP 敏感的钾通道开放剂对离体肺保护的试验研究 胡定辉，刘志勇，王洪斌，宋晓春 东南大学附属中大医院，江苏南京（210009 ） E-mail ：hudinghui2000@163.com 摘 要：目的研究ATP 敏感的钾离子通道开放剂（PCOs ）吡那地尔（Pinacidil ）在离体兔 肺保护中的作用。方法 将 18 只杂种家兔（灰色）随机分成3 组,建立离体肺缺血再灌注模 型。对照组（n ＝6 ）自体温血直接再灌注2 小时；缺血组（n ＝6 ）用LPD(低钾右旋糖酐保 存液)+DMSO(二甲基亚砜)灌洗， 4 ℃保存8 小时后自体温血再灌注2 小时；试验组（n ＝6 ） 用LPD ＋100µmol/L 吡那地尔(溶于DMSO 中)灌洗，4 ℃保存8 小时后自体温血再灌注2 小 时。每隔30 分钟分别经肺动脉和左房插管取血行血气分析，评估离体肺功能；测量湿/干比 重，估计肺水含量；光镜下行肺组织形态学检查；制做肺组织匀浆测定超氧物歧化酶（SOD ）、 肿瘤坏死因子-α （TNF-α）和白介素-8 （IL-8 ）含量。结果 试验组氧分压差(∆Po2)和SOD 比 缺血组明显升高（P ＜0.05 ）;组织形态学检查，试验组损伤轻于缺血组；试验组的TNF-α和 IL-8 含量明显低于缺血组（P ＜0.05 ）。结论 在保存时间不超过 8 小时情况下，用加入吡那 地尔的LPD 液灌洗和保存肺，能更好的保护肺功能。 关键词：肺保存，缺血再灌注损伤，ATP敏感钾通道，吡那地尔 自1983年加拿大多伦多总院Cooper等完成第一例右肺移植以来，肺移植已经发展成为终 末期肺疾病的主要治疗手段。但肺缺血再灌注损伤仍然是影响手术预后的重要因素。研究人 员通过采用低温、膨肺、逆灌和迟灌等改进肺灌注和保存技术, 以及在保存液中添加前列腺 素-E1、还原型谷光甘肽、血红素加氧酶等改变保存液成分的方式，取得了良好的保存效果 [1] 。 同样在1983年Noma首先描述了KATP通道在膜兴奋性偶联、分子生物能量学、器官和组 织保护等方面起着重要的作用[2] 。后来研究人员将ATP敏感的钾通道开放剂（PCOs ）引入心 肌保护领域，并证实其在抑制心肌缺血再灌注损伤中所起的重要作用[3] 。而在肺保护方面， 仅有少量关于PCOs与传统的Euro-Collins液或乳酸林格液配伍的肺保护作用的报道。研究证 实新型的LPD液比Euro-Collins液具有更好的肺保护效果[4] 。本试验将PCOs加入LPD液中，研 究其对缺血再灌注肺脏的保护作用及其作用机制。 1. 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 试验动物 成年杂种家兔18只（灰色），雌雄不限，体重2.8-3.5kg ，由东南大学医学 院试验动物中心提供。 1.1.2 试验试剂 吡那地尔（Pinacidil ）购于美国sigma公司;SOD检测试剂盒由南京建成生物 工程研究所提供；TNF-α和IL-8检测试剂盒由上海西唐生物科技有限公司提供；自制LPD液 成分如下： CaCl2 0.3mmol/L、MgSO4 0.8 mmol/L、 NaHCO3 1.0mmol/L、NaCl 135.4mmol/L 、 KCl 6.0mmol/L、Na2HPO4 0.8 mmol /L、葡萄糖 0.9g/L 、右旋糖酐-40 50g/L。 1.2 方法 1.2.1 试验分组 对照组（n ＝6 ）自体温血直接灌注2 小时；缺血组（n ＝6 ）用LPD 液+DMSO 灌洗，在4 ℃保存8 小时后自体温血再灌注2 小时；试验组（n ＝6 ）用LPD 液＋100µmol/L 吡那地尔（溶于DMSO ）灌洗，在4 ℃保存8 小时后自体温血再灌注2 小时。 1.2.2 离体兔肺的获取 耳缘静脉注射3 ％戊巴比妥钠（30mg/kg ）麻醉，气管切开插管机械 -1- 通气，吸入氧分数21 ％，吸呼比1：2 ，频率24 次/分，潮气量12ml/kg。正中切口开胸，打 开心包，游离上、下腔静脉和主、肺动脉根部并套带。耳缘静脉注射肝素钠（1000U