PCR方法检测食品中的转基因成分35S和NOS的研究.pdfVIP

， ， 食品科学 !分析检验 ! #$$# %’( #) *( + !# 方法检测食品中的转基因成分 $% 和’( 的研究 刘光明 厦门出入境检验检疫局 厦门 ), -$ -# 苏文金 栾国彦 宋思扬 梁基选 厦门大学生命科学学院 厦门 ), -$$+ 摘 要 根据转基因农作物中最常用的花椰菜叶病毒启动子. /01% )+2 3 和根癌农杆菌终止子. *42 3 的序列，设计并合 成了两对不同的引物和相对应的两种荧光双链探针. 56/7 3 ，分别建立了常规7/8 、应用56/7 的新型实时荧光7/8 检 测转基因成分)+2 启动子和*42 终止子的方法。利用该套方法对冷冻马铃薯条、大豆、冷冻玉米棒、甜椒、番茄等实物 样品进行了检测，发现 份样品中有 份检出 启动子、 终止子，份样品结果为阴性。结果表明我们建立的两 -- + )+2 *42 , 种7/8 方法均能有效检测出)+2 和*42 片段，其中常规7/8 方法具有灵敏度高、特异性好的特点；应用56/7 的新型 实时荧光7/8 方法则更为简便、快速、准确，有很好的应用前景和研究价值。 关键词 转基因 7/8 荧光7/8 荧光双链探针 !#$%’$ 9:; 0=?’; @0A A = ;A=0B’A: 7/8 C;=:D E 0AA0FGH =0GAH;G? ?CIG;G= )+2 IC=; D;J;D EC /0K’E’@; 1A0? %KA 0GD *42 =;CG0= D;J;D EC LHB0?=;KC =KC;E0?;GA G EDA( L??DGH = =:; AI;M ?E? A;NK;G?; E )+2 0GD *42 O:?: :0J; B;;G KA;D G =0GAH;G? ?IA E;NK;G=’FP =@ I0A E IC;A 0GD =@ I0A E ?;AIGDGH 5’KI:; DKB’; Q ?:0G IB;A . 56/7 3 @;; D;AHG;D = 0CI’EF I0=A E )+2 IC=; 0GD *42 =;CG0=P = 0’’@ E H;G;0’ A?;;GGH E EDA( 7/8 R 5’K;A?;G?; 7/8 . 57/83 C;=:DA @;; ;A=0B’A:;D E =:; 0AA0F E =0GAH;G? ?CIG;G= )+2 0GD *42( -- A0CI’;A @;; =;A=;D @=: 7/8 R 57/8( 9:; ;AK’=A A:@;D =:0= + A0CI’;A @;; IA=J;P , A0CI’;A @;; G;H0=J;( 9:; D;A?B;D C;=:DA ;G0B’;D 0 A;GA=J;、 、 AI;?E? ACI’; 0GD 0?M ?K0=; 0AA0F E =0GAH;G? ?CIG;G= 0GD =:KA IJD;D R 0 KA;EK’ =’ E K=G; 0G0’FAA E 0@ 0GD I?;AA;D ED IDK?=A( ()* +,%-# 90GAH;G? 7/8 5’K;A?;G?; 7/8 5’KI:; DKB’; Q ?:0G IB; 世纪 年代以来，随着以基因工程为特征的 目前植物性转基因食品的检测采用的技术路线 #$ S$ 现代生物技术的飞速发展，转基因技术在食品资源 有两条，一是检测插入的外源基因，主要应用7/8 改造中得到广泛应用。目前转基因食品中大多来源 U ) V