以pmi基因为择标记露地菊转ptdhar基因体系的建立.pdf

东北林业大学硕士论文 摘要 露地菊(Chrysanthemum 著的特点是植株低矮，覆盖力强，繁殖容易，管理粗放，适应范围广，抗逆性强，花色 丰富，花多而密，花期长，观赏价值高。在我国东北盐碱地区以及城市盐渍化严重的地 区，大部分栽植的露地菊受盐碱的影响则表现出叶色萎黄、生长不良、花芽分化受阻甚 至死亡的现象。本研究旨在利用安全标记的遗传转化方法获得转化植株，培育出抗盐碱 能力更强的新品系，丰富盐碱地区花卉种植品种，提高盐碱地区花卉种植业收益水平。 法，把耐盐基因PtDHAR转入露地菊‘火焰’基因组中。 主要研究结果如下： pGEM圆．T EHAl05中。 (2)露地菊‘火焰’对甘露糖和头孢霉素的敏感性试验。研究结果当甘露糖浓度 为10g／L时即能明显抑制叶片外植体的分化和不定芽的产生，可以作为遗传转化时叶片 外植体筛选培养的临界耐受浓度；分化率和不定芽增殖系数随着头孢霉素(Cef)浓度 的升高而逐渐下降，300mg／L的Cef浓度可作为叶片外植体在共培养后抑制农杆菌的抑 菌浓度。 (3)露地菊‘火焰’遗传转化体系的建立。以预培养1d的叶片外植体为转化材 式进行筛选，初期筛选培养基的甘露糖浓度为89／L，后期筛选培养基中甘露糖的浓度 100mg／L的生根筛选培养基中继续筛选，直至长势健壮并生根的抗性植株产生。 (4)转化植株的检测。对获得的9株抗性植株进行PCR检测，结果表明获得了2 株转尸fD删R基因植株。 关键词 露地菊；磷酸甘露糖异构酶尸M；PtDHAR；耐盐碱；遗传转化 Abstract !!!!!!!!!!!!!!!-‘!。___’!_l‘-··-I__‘!··。!!!·o!!。-_--___。!__--_·_··-_llI·_--·l___-_--_-I—II·_-l_I·-_·ll·_。- Abstract is used Chrysanthemummorifolium inornamentalandflower．The commonly gardens featuresarelow to theextensive significant powerplant，coverage，easy manage breeding， resistant wide，and to great more strong，a variety,spenddense，longfloweringperiod， ornamental value．InsalineandNortheast asthe China,邪well of intense citysaline，most of cultivation affectedsaltoftheexhibitleaf Chrysanthemum morifoliumby chlorosis，bad isblockedorevendeath．Thisaimstotake ofthe token growth，bud study advantagesecurity the of transformationmetllodtoobtain