视网膜Sonic+hedgehog信号通路在豚鼠形觉剥夺性近视眼模型中的作用机制的研究.pdfVIP

中文摘要 c 视网膜Soni hedgehog信号通路在豚鼠形觉剥夺 性近视眼模型中的作用机制研究 中文摘要 前言 近视发病机制至今未完全明确，目前公认的近视发病机制之一是外界因 素刺激了视网膜脉络膜中的某些调控因子，影响了转化生长因子B(trans— forminggrowthfactor—B，TGF—B)等生物活性物质的平衡状态，导致基质金属 蛋白酶(matrix 轴增长而产生近视。因此寻找确切的信号调控因子已成为近视发病机制研究的热 点。已有研究和我们的前期实验均提示Sonichedgehog(Shh)可能作为一种视网 膜重要信号因子参与了眼轴的生长导致近视形成。同时眼外研究中发现Shh信号 通路可调控删P。、TGF-B等活性因子的表达，亦提示上游视网膜Shh信号通路在 近视发展过程中可能的下游通路。因此我们采用豚鼠的形觉剥夺性近视模型，通 对近视调控的作用和具体调控途径，为近视眼防治提供依据。 第一部分：豚鼠形觉剥夺性近视眼视网膜Shh信号通路和 巩膜MMP-2、TGF-B表达变化 目的：在豚鼠形觉剥夺性近视模型(form-deprivationmyopia，FDM)中检 测视网膜Shh及相关下游因子的表达变化，观察巩膜中删P．2和TGF-B含量的改 变。 1 中文摘要 10只和4只豚鼠进行检影验光及眼轴长度等生物学测量后，处死取眼球行免疫荧 fluorescent reverse 定量逆转录聚合酶链反应(real-time quantitative chain reaction，real-timePCR)检测视网膜Shh、 transcriptionpolymerase 巩膜组织中埘P一2、TGF-13的表达变化。 结果：形觉剥夺1周、2周及4周后，FDM组遮盖眼较对侧眼分别诱导出 延长，近视程度加剧。形觉剥夺1周、2周及4周后，FDM组诱导出的相对眼轴 形觉剥夺l周、2周及4周后，FDM组诱导出的相对玻璃体腔长度分别延长 网膜的神经节细胞胞浆内。形觉剥夺4周时，FDM组中遮盖眼较对侧眼ShhmRNA 示，形觉剥夺2周开始，遮盖眼的Shh蛋白表达水平开始较左眼升高；遮盖眼巩 膜删P一2在剥夺2周后开始明显升高，而TGF-13表达水平下降，并持续至4周。 结论：在半透明薄膜法诱导的豚鼠FDM中，伴随视网膜组织Shh及Ptc一1 表达水平升高，以及巩膜姗P一2表达上升和TGF—B表达下降，提示Shh信号 通路可能参与了豚鼠FDM的调控过程。 第二部分：玻璃体腔内注射Sonichedgehog溶液对豚鼠近视 发生发展的作用及相关机制研究 目的：通过外源性玻璃体腔内注射Shh溶液来观察豚鼠近视发生发展及巩膜 组织中删P-2、TGF_B表达水平的变化。 2 中文摘要 方法：将出生2—3周龄三色健康豚鼠40只随机分为2组，每组20只。每组的右 serum 眼进行Shh-N／O．1％牛血清蛋白(bovinealbumin，BSA)注射，左眼进行 0．I％BSA注射。双眼依次进行，隔2天注射一次，每次每只眼球注射10u1，共注 ll u 射4次。两组的Shh—N注药浓度分别为20g／ml(Shh20组)和50g／ml(Shh50 组)。在注药的第14天(2周)进行