pcr仪温度场量和校验方法的研究.pdfVIP

摘要 PCR技术能快速地在体外试管内扩增目标基因或DNA片段，是科研人员获得目标 DNA片段的常用技术，在生物医学领域得到广泛的应用。 PCR仪样品块的温度精度和均匀性是影响PCR反应效果的重要因素。为了测量样品 块的温度均匀性及其它温度参数，要求测量工具必须具有多个测量通道，且具有极佳的测 量精度、响应速度、通道一致性和通道同步性。本文介绍了一种多通道温度检测与校验系 统，它可以实时检测PCR仪样品块的温度场，分析PCR仪的温度性能，并给出PCR仪的 温度性能判别结果，实现对PcR仪温度场的校验，很好地满足了PcR仪温度场控制的特 殊要求。 本文从PCR仪的测温要求和常用测温方法入手，对温度传感器和测温点的选择方法 进行分析，完成了多通道温度检测系统的设计和建立，再结合数据采集系统的编程特点， 完成了多通道温度采集与处理软件的编写，实现对13个测温点的温度进行实时采集与处 理，并建立了间接测温的热模型，找出试剂温度相对于反应孔温度的延迟时间和同一时刻 试剂温度与反应孔温度的关系。此外，对系统的性能进行了实验分析。测试实验表明，本 系统精度高、一致性好，抗干扰能力强，整体性能满足实际应用要求。同时提出了系统的 改进意见，对今后的工作进行了展望。 关键词：PCR，温度检测，校验，热模型，实验分析 n Abstract caIl 0rDNA invi廿o．Ithas PCR钯c11llology quicl【lyaIIlpl毋血etargetgene 6．agmem iIl_t0oneoftllecommon forresearcherst0obt豳DNA it 出IVeloped tecllllologies Ijragmems，and iIl usedbiomedicalfield． h邪be明谢dely The PCR block factor sample temp咖眦aCcuraCy觚dullifo肌埘of is孤impon觚t tllePCR删ion．Tome鹊urettle omer 枷uenciIlg temper栅e试fomli够趾dtempe硪ture of measurementtoolsare t0haVeInoretllanone block parameterss孤叩le requircd me雏urement tohaveeXcellent of ch锄el，觚d aCcumcy，s】peedresp伽-se，cha衄el coIlsistency 锄ds)，Ilchr0Ilization．Ttlisp印er amulti—ckmrlel presems teIIlpe功：tllre calibration candeteCtthe fieldofPCR blockiIlreal system．n temperature s如叩le tiIne，锄d tlle ofeaChPCRillst】咖entbefore tlle aIlalyzetem肼鄹咖鹏perf-o咖觚ce