综述 昆虫抗药性检测的研究进展.pdfVIP

i91京医科大学硕f:学位论文 综述 昆虫杭药性检测的研究进展 摘要;近年来由于杀虫剂的广泛使用，造成了普遍的昆虫抗药性 问题，对死虫抗药性的检测可适时掌握其抗药性发生发展水平。本文 概述了昆虫抗药性检测的生物测定法、生化测定法、免疫测定法以及 分子生物学测定法的原理、方法，讨论其利弊及最新发展动态，以寻 求快速、有效、合理的昆虫抗药性综合检测手段。 关健词:昆虫 抗药性 检测 利用杀虫剂进行化学防制一直是媒介防制中的主要方法，但因其 长期、大量、广泛使用而引起的抗药性几乎在所有主要的昆虫种群中 出现，近年来有日趋严重之势。杭药性检测可用于评价和检验抗药性， 成为预防杭药性发生与发展的重要前提，有助于抗药性治理工作。主 要方法有生物测定法，生化测定法、免疫测定法以及分子生物学测定 法。 生物测定法:是从现场采集蚊虫，饲养繁殖一代，给予幼虫或成 虫不同浓度 (剂量)的杀虫剂，根据死亡率 (转换成机率值)和浓度 (剂量)的对数绘出毒力回归线，并与标准敏感品系比较得出结论，’〔。 最常用的指标为半数致死浓度 (LC,,)和半数致死剂量 (LDso)。半数 致死量法2，是‘抗药性检测的主要方法，可反映坟虫群体中大多数个体 的抗药性分布情况;区分剂量法3(-61可在早期简单的判断昆虫种群的抗 性水平，但仅是定性检测。另一指标是半数击倒时间 (KT,o)，可反映 昆虫媒介在杀A411持续选择压力下的敏感性状况并减少个体差异。一 般采用纤维膜、尼龙膜、玻璃#k-la对成虫、幼虫、卯等了一〔，”进行检测。 Choo等 (2000)用表面接触法和玻璃瓶法 (WHO)检测德国小镰 (Blattellagermanica)对澳氰菊醋杭性，比较这两种方法，显示 KD,。和KT,。值有显著相关，玻璃瓶法在野外环境下所则结果类似，而 表面接触法对确定杭性规模有更强的敏感性“),Ladonni等(2001)用 1有京医科大学硕于学位仑又 三种不同的生物测定法评价德国小镰对二氯苯醚菊醋的抗性状况。用 玻璃瓶法检测成虫的LT,,,KT,,，用盖皿法检测蛹的LTso,KT,o，用表 面接触法检测成虫和蛹的LD;,。三种生物测定法显示出德国小镰对二 氛苯醚菊醋具不同程度的抗性。杭性成虫的KT,LD,o,LT,。分别是敏 感成虫的6.7倍、12.8倍、7,5倍。同样，杭性蛹的KT,,,LD,o,LT,,, 分别是敏感蛹的17倍、8倍、6.4倍。尽管成虫和蛹对二氯苯醚菊醋 的敏感程度相似，成虫用表面接触法比另两种方法更为敏感，而蛹的 KT法优于LT,LD法。结果表明，表面接触法和KT测试法分别是检测 德国小镰成虫和蛹对二氯苯醚菊醋抗性的最敏感方法，”〔。Moyses和 Gfeller(2001)用表面接触法比较了 13种杀虫剂对猫栉头蚤 (ctenocephslidesfelis)的作用效果，认为表面接触法的显著优 点是剂量不依赖于虫体活力，缺点是必须克服渗透屏障，且操作冗繁 0,Rust等(2002)用幼虫测定法确定野外型猫栉头蚤对毗虫琳的敏 感基线，采用易于收集和运输的虫卵，结合区分剂量，仅用40枚虫 卵即可测定157‘ 总之，大多数标准生物测定法都能测出昆虫抗药性，但在昆虫特 定的生命阶段选用适当的暴露方法,6【1常能提高对抗性品系和敏感品 系的鉴别力。生物测定法操作简便，结果直观，费用低廉，其缺点是二 (1)不能反映样本的基因型状况;(2)不能在样本早期发展阶段检测杭 性;(3)费时(儿天或凡周)，需大量活虫样本;(4)受多种因素影响， 如相对湿度、溶剂、C02接触程度及收集运输成虫的困难程度，”〔。 生化测定法:根据昆虫抗药性生化机制来检测杭性相关酶的活 力，包括对no-酶、不敏感乙酞胆碱醋酶、谷脆甘肤-S一转移酶等的测 定，主要有滤纸法、微板法、电泳法。 以滤纸或微量滴定板为载体，将含抗性相关酶类的昆虫匀装与相 应底物反应，对其产物进行微量色谱分析。最早是采用多个昆虫的混 合匀浆，现已发展到对单个昆虫的测定。 Szlendak等 (2000)用醋酶法测两种满 (Acarussir。和 A far