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现代生物技 术及其应用 一、 生物技术概述 ?生物技术(biotechnology) 又称生物工艺学, 生物工程学。是根据生物学、化学和工程学的原理进行工业规模的经营和开发微生物、动植物细胞及其亚细胞组分, 进而利用生物体所具有的功能元件(如基因、蛋白质)等来提供商品或社会服务的一门综合性科学技术。 ?现代生物技术( Moden Biotechnology) 主要指基因工程、细胞工程、酶工程和发 酵工程。 ?生物技术与遗传因子的发现 ?基因工程(gene engineering) 又称基因操作(gene manipulation),重组DNA(recombinant DNA)。基因工程是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因(DNA分子), 按预先设计的蓝图，在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞, 以改变生物原有的遗传特性,获得新品种, 生产新产品, 或是研究基因的结构和功能。 ?遗传工程(genetic engineering)一词产生于19世纪20年代，是遗传学和工程学相结合的一门技术科学。借用工程技术上的设计思想, 在离体条件下,对生物细胞、细胞器、染色体或DNA分子进行按图施工的遗传操作,以求定向地改造生物的遗传性。遗传工程的概念有广义和狭义之分。 ?广义的遗传工程包括传统遗传操作中的杂交技术和现代遗传操作中的基因工程和细胞工程, 狭义的遗传工程仅指基因工程。 ?细胞工程(cell engineering) ◆应用细胞生物学的原理和方法,结合工程学的技术手段,按照人们预先的设计,有计划地改变或创造细胞遗传性的技术,以及在体外大量培养和繁殖细胞,或获得细胞产品,或利用细胞体本身的技术领域。 ◆主要内容包括细胞融合、细胞拆合、染色体转移、基因转移、细胞或组织培养等。由于所用细胞的来源不同，细胞工程又分为微生物细胞工程、植物细胞工程、动物细胞工程等。 ?酶工程(enzyme engineering) ◆又称酶技术。它是围绕着酶所特有的生化催化特性,结合现代的技术手段,在体外模拟或在常温常压下生成酶反应的产品以及利用重组DNA技术定向改变酶,进行酶的修饰,或酶的全人工合成。 ◆其主要内容包括酶的化学修饰、酶的固定化、酶反应器等。 ?蛋白质工程(protein engineering) ◆是更广义上的包括酶工程在内的蛋白质修饰操作,通过对蛋白质及酶的化学修饰及基因改造获得具有特殊功能的非天然蛋白质的技术。 ◆主要是根据蛋白质的结构和功能间的相互关系,利用基因工程技术,或用化学方法,合成基因,改造基因,以便合成新的蛋白质,或改变蛋白质的活性、功能以及溶解性等。 ?发酵工程(fermentation engineering) ◆又称微生物工程,微生物发酵工程。 ◆利用生物,主要是微生物的某种特定功能,通过现代化工程技术手段,生产有用物质, 或把微生物直接用于某种工业化生产的一种技术体系。 ◆主要内容包括菌种选育, 发酵生产微生物,或植物细胞的代谢产物, 生产微生物菌体,最佳培养条件的优化组合等。 二、 基因工程技术 基因工程是20世纪70年代发展起来的遗传学的一个分支学科 ◆创建基因工程技术的两位大师 ?第一个重组体的构建 1972年，美国斯坦福大学P.Berg等在PNAS上发表了题为∶“Biochemical methode for inserting new genetic information into DNA of Simian Virus 40:circular SV40 DNA molecules cotaining lamda phage genes and the galactose operon of Escherichia coli. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 69:2904-2909, 1972”，标志着基因工程技术的诞生。  ?第一个有功能重组体的构建 ◆虽然Berg的工作具有划时代的意义，但是他们并没有证明体外重组的DNA分子具有生物学功能。 ◆1973年，S.N.Cohen等在美国PNAS上发表了题为“Construction of Biologically Functional Bacterial Plasmid In Vitro” （S. N. Cohen, A. C. Y. Chang, H. W. Borer, and R. B. Helling, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 70:3240-3244, 1973）的论文，宣布体外构建的细菌质粒能够在细胞中进行表达,从而完善了Berg开创的基因重组技术。 ?质粒 pSC101 的获得