12核酸化学3RNA的结构和特性.pptVIP

反义RNA (anti-sense RNA) 反义RNA (anti-sense RNA)是指与mRNA互补的RNA分子。这种反义RNA能与mRNA分子特异性地互补结合，从而抑制该mRNA的加工与翻译，是原核细胞中基因表达调控的一种方式。然而，许多实验证明，在真核细胞中亦存在反义RNA，但其功能尚未全部明了。最近几年来通过人工合成反义RNA的基因，并将之导入细胞内，转录出反义RNA，能抑制特定基因的表达，阻断该基因的功能，有助于了解该基因对细胞生长和分化的作用。同时也暗示了该方法对肿瘤实施基因治疗的可能性。 反义RNA按其作用机制可分为三大类 Ⅰ类：这类反义RNA直接作用于其靶mRNA的SD序列和/或编码区，引起翻译的直接抑制(ⅠA类)或与靶mRNA结合后引起该双链RNA分子对RNA酶Ⅲ的敏感性增加，使其降解(ⅠB类)； Ⅱ类：这类反义RNA与mRNA的SD序列的上游非编码区结合，从而抑制靶mRNA的翻译功能。其作用机制尚不完全清楚，可能是反义RNA与靶mRNA的上游序列结合后会引起核糖体结合位点区域的二级结构发生改变，因而阻止了核糖体的结合； Ⅲ类：这类反义RNA可直接抑制靶mRNA的转录。 * * * * * rRNA 核糖体RNA 原核生物：5S、16S、23S 真核生物：5S、5.8S、18S、28S。 原核生物核糖体的50S亚基（大亚基）由5S及23S rRNA和蛋白质组成；30S亚基（小亚基）由16S rRNA与蛋白质组成。 真核生物核糖体的60S亚基（大亚基）由5S、5.8S及28S rRNA与蛋白质形成；40S亚基（小亚基）由18S rRNA与蛋白质组成 核糖体，蛋白质和核酸的复合体 30S 亚基的三维结构 核糖体上蛋白质合成过程中mRNA、tRNA 的作 用，及肽链的延伸示意图。 mRNA tRNA 核糖体 16 S rRNA序列在细菌分类鉴定中的作用 细菌16 S rRNA以其在进化上的特征性序列，已被广泛用于细菌分类和鉴定的分子指标。通过比较各类生物16 S rRNA的基因序列，从序列差异计算它们之间的进化距离，可以绘出生物进化树。因此，16 S rRNA序列分析技术的基本原理就是从微生物样本中16 S rRNA的基因片段，通过克隆、测序或酶切、探针杂交获得16 S rRNA序列信息，再与16 S rRNA数据库中的序列数据或其他数据进行比较，确定其在进化树中位置，从而鉴定样本中可能存在的微生物种类。 tRNA 1. 单链小分子； 2. 含有稀有碱基或修饰碱基； 3. 5’端总是磷酸化， 5’末端往往是pG； 4. 3’端是CpCpAOH序列； 5. 三叶草型二级结构； 6. 倒L型三级结构。 分析3300多种tRNA的全序列发现，tRNA均为74~95 Nt组成的小分子，不同tRNA大小的变化在45和46位可变环的伸缩。 tRNA与氨基酸的连接 氨基酸臂 二氢尿嘧啶环 TψC环 反密码子环 三级结构呈倒L形结构 单股tRNA链可通过自身折叠形成四个螺旋区和四个环的基本结构，类似一个三叶草。 tRNA碱基的修饰有83种，每个tRNA约含有10~15个稀有碱基，如ψ、甲基化的嘌呤和嘧啶核苷、DH、胸腺嘧啶(T)核苷和辫苷（Q）等。 3’端均为CCA-OH序列，氨基酸接在腺苷酸残基上，CCA-OH序列称为氨基酸接受臂(amino acid acceptor arm)。3’-端第5~11位核苷酸与5’-端第1~7位核苷酸形成的螺旋区称氨基酸接受茎(amino acid acceptor stem)。 TψC环由7 Nt组成,参与tRNA与核糖体表面的结合。 额外环或可变环 由3~18个不同种类和数量的碱基组成，高度可变，并富含稀有碱基。 反密码子环由7 Nt组成，处于34、35、36位的3个碱基为反密码子。 二氢尿嘧啶环(D-loop)由8~12个碱基组成，含有1~3个修饰碱基(D) 一条mRNA上可以有多个核糖体同时合成蛋白质 原核生物基因转录与蛋白质的合成可以同步进行 真核生物蛋白质合成的起始 RNA的加工类型 1. Cleavage (切割） 2. Trimming（修剪） 3. Splicing（剪接） 4. Editing（编辑） 5. Modification（修饰） 卵清白蛋白基因mRNA的加工示意图 RNA 编辑（editing）发生在mRNA水平上, 多数为插入碱基 Crick的中心法则 DNA 1957年 转录 RNA 翻译 Protein DNA 1970年 反转录 Protein RNA 反转录病毒最早在20世纪初由Rous氏从邻居小孩抱来的一只得了肿瘤的鸡上分离到，命名为Rous sarcoma virus。此后从鸡和小鼠上还分离到了