5核酸的生物合成.ppt

遗传信息传递的 中心法则 目 录 一、 DNA的生物合成（细胞内合成DNA的过程） 一、半保留复制的实验依据和意义 DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板(template)按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。 （2）复制的起始点与方向 亲代DNA开链，复制起始点呈叉型移动。 1、复制起始点： DNA复制要从DNA分子的特定 部位开始，此部位称复制起始点。 原核：仅含一个 ，约245 bp,特殊的重复序列。 真核：多个起始点 例：酵母17号染色体含400个。 2、复制方向：含三种机制 ?2个起点，2个叉，各合成一条链（腺病毒）。 ?1个起点1个叉，同方向合成两条链（单向复制）。 ?1个起点2个叉，不同方向合成两条链，此为常 见方式（双向复制）。 大肠杆菌复制起点成串排列的重复序列 * DNA聚合酶催化的链延长反应 大肠杆菌三种DNA聚合酶比较 大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ全酶的结构和功能 DNA聚合酶的3′- 5′外切酶水解位点 DNA聚合酶5′- 3′外切酶活力 DNA聚合酶的校对功能 原核细胞DNA的半不连续复制复制过程 大肠杆菌复制体结构示意图 复制叉处前导链和随后链同时合成的工作模型 大肠杆菌染色体复制的终止 真核细胞DNA复制 端粒酶（Telomerase） [端粒酶生物学意义]： 1、合成端区，保证染色体复制的完整性。 2、保护DNA末段不被降解及相互融合。 真核生物复制的特点 1、复制速度：是原核的1/10，但复制起始点多。 2、引物和冈琦片段小于原核，引物为10个，片段 100~200；原核引物十几~几十，片段1000~2000。 3、复制需DNA pol及多种因子参加， pol ? pol ?在 核内起主要作用。 4、 pol ?为线粒体复制酶。 5、 DNA复制位于细胞周期的S期。 复制的忠实性 起始时以RNA作为引物的作用 真核和原核DNA细胞复制比较 2、逆 转 录 作 用 * 反转录酶：具三种酶活性。 逆转录病毒（RNA肿瘤病毒）的生活周期 3、DNA的损伤与修复 DNA紫外线损伤的光裂合酶修复 DNA的损伤和切除修复 DNA的重组修复 二、 RNA的生物合成 1、DNA指导下RNA的合成（转录） （一） 转录的概念和DNA的有义链和反义链 RNA聚合酶催化的反应 大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图 [组成]：5个亚基，?2??’?为全酶， ?2??’为核心酶。 [作用]： ? 识别DNA分子中转录的起始部位。 ?促进与模板链结合，并使DNA双链打开17bp.。 ?催化NTP的聚合，完成一条RNA链的聚合反应。 识别转录终止信号，停止聚合反应，参与转录 水平的调控。 [特点]： ?聚合速率慢，30~85NTP/秒。 ?缺乏外切酶活性,无校对功能，错误率10-6。 ?不同的?识别不同的启动子。例：?32识别热休 克启动子。 ?可被药物抑制（利福平）。人的RNA聚合酶对利 福平不敏感。利用此特点可研制杀菌药物。 真核启动子结构（以RNA polⅡ为例） ?于-25处含AT富集区, 共有序列TATAA（TATA box） ?-70处含共有序列CAAT ,还含许多其它box ,例如 GC box,E-box等。 ?含增强子[enhancer]和静息子[silencsr] RNA polⅠ和 RNA polⅢ与聚合酶Ⅱ所识别的启动 子差异较大。 *RNA合成过程 RNA链的延伸图解 （四）RNA转录后的加工 ⑵ 原核 tRNA前体分子的加工 ⑶ 真核细胞mRNA的加工 * 真核生物和原核生物转录的差别 DNA和RNA合成的比较 噬菌体Q?的合成 3、 核酸合成的抑制剂 4、 基因工程及分子生物学 技术简介 * 基因工程简介 基因工程的操作技术 大白鼠的生长激素基因插入到一个质粒中去，在金属巯基蛋白启动子旁边，这个启动子被金属镉所活化 PCR技术原理示意图 基因工程的应用和前景 克隆羊多利的诞生 A. 负链的合成 B. 正链的合成 病毒的正链 复制中间体 复制中间体 新合成的正链 新合成的负链 负链