基因表达调控本科用2013.pptVIP

第 一 节基因表达与调控的基本概念与特点 第 二 节  原核基因表达调控 原核生物基因组的特点 基因组较小，呈环状 结构基因是连续的 很少有重复序列和基因重叠 结构基因占基因组的比例高（50%） 编码蛋白质的基因均为单拷贝基因，编码rRNA、tRNA的基因仍为多拷贝基因。 结构基因与调控序列以操纵子方式排列。 SD序列是原核mRNA 起始密码AUG上游（7-13bp左右）的一段短核苷酸序列（4-9bp），富含嘌呤，与16S rRNA 3’端互补（又称核糖体结合序列）。 SD序列的顺序、与AUG的距离（IL-2为7b）、蛋白质与SD序列的结合、 mRNA二级结构隐蔽SD序列等均影响翻译的起始 释放因子RF2的自我调控： 5……－－－U G A C－－－……….………..UAG 3 小 结 1、基因表达调控的基本特征、方式、分子基础、层次和意义。 2、原核基因组的特点（6个） 3、操纵子的结构及功能 3、乳糖操纵子的调控机制（3个） 4、色氨酸操纵子的阻遏机制与衰减机制 5、概念：基因、基因组、基因表达、结构基因、管家基因、操纵子、启动子、操纵序列、顺式作用元件、反式作用因子、衰减子 第 三 节 真核基因表达调节 一、真核生物基因表达的特点 真核基因组结构庞大，表达过程更复杂 结构基因是不连续的，转录后需要加工 有大量重复序列 结构基因占基因组的比例低（10%） mRNA为单顺反子 染色质结构影响基因表达 转录与翻译分隔进行 小 结 1、真核基因组的特点 （庞大复杂、重复序列、不连续性、结构基因比例低、单顺反子） 2、真核基因表达调控的特点 （复杂、 层次更多、染色质变化、 3种RNApol、启动子复杂、转录翻译分隔、修饰加工） 3、增强子的作用特点、转录因子的结构域 3、概念：单顺反子、增强子、转录因子、miRNA、siRNA、RNA干涉 终止子(terminator T)是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列。在一个操纵子中至少在结构基因群最后一个基因的后面有一个终止子。 原核生物中通过翻译前导肽而实现控制DNA的转录的调控方式称衰减作用。 当核糖体能翻译前导区时，在终止子1 上形成终止发夹结构。但是当核糖体不能翻译前导区时，不能形成终止发夹结构，RNA 聚合酶转录编码区。因此这种抗终止作用(Antitermination) 依赖于外界环境影响核糖体在这段前导区移动的能力。 五、转录起始复合物的动态构成是转录调控的主要方式 polⅡ TFⅡH TAF TFⅡF TAF TAF TFⅡA TFⅡB TBP 真核RNA聚合酶Ⅱ在转录因子(包括EBP)帮助下，形成的转录起始复合物；TFⅡD包括TBP和TAF(TBP相关因子). TATA DNA EBP 六、转录后调控主要影响mRNA的结构与功能 内含子的调控 （一）mRNA的稳定性 与5’-帽子结构、3’-poly A、蛋白产物等有关 （二）非编码小分子RNA的调控 （三）mRNA前体的选择性剪接 siRNA、miRNA的调控 七、翻译水平及翻译后的调控 起始因子的磷酸化修饰； RNA结合蛋白调控翻译起始； 蛋白质运输、修饰及水解； 小分子RNA调控翻译效率 长链非编码RNA的调控（200nt） 非编码RNA：微小RNA（miRNA) 小干扰RNA（siRNA) 微小RNA（miRNA)： 长度20－25nt的单链RNA，由具有茎环结构的约70－90nt的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成； 由RNApolⅡ合成。 特点：在不同生物体普遍存在；序列具有一定的物种保守性；表达具有时间空间特异性；miRNA基因大部分位于基因间隔区。 作用方式：与其他蛋白质一起组成RNA诱导的沉默复合体（RISC），与靶mRNA的3’端非翻译区互补结合，抑制该mRNA的翻译。 意义：参与发育过程中内源基因表达的调节 小干扰RNA（siRNA)： 一类约21～23bp的小分子双链RNA。由Dicer酶切割外源双链RNA（dsRNA）产生或人工合成。 作用方式：参与RISC的组成，与靶mRNA完全互补结合，导致靶mRNA降解，阻断翻译。 RNA干涉（RNAi）：由siRNA介导的基因表达抑制作用。 意义：对抗外源核酸入侵；应用于基因功能研究。 都可以抑制靶mRNA的翻译 作用方式 都是RISC组分，在介导沉默机制上有重叠 RISC组分 依赖Dicer酶切割产生 Dicer酶 由双链的RNA或RNA前体形成的 前体 都约在22nt左右 长度 miRNA与siRNA的相同点 miRNA与SiRNA的差异 阻遏翻译 降解靶mRNA 功能